保健食品中原花青素的测定.doc

保健食品中原花青素的测定 Determination of procyanidins in health food 范围 本方法规定了保健食品中原花青素的测定方法。 本方法适用于保健食品中原花青素的含量测定。 本方法最低检出量为3μg，最低检出浓度为3μg/mL。 本方法最佳线性范围：3～150μg/mL。 原理 原花青素是含有儿茶素和表儿茶素单元的聚合物。原花青素本身无色，但经过用热酸处理后，可以生成深红色的花青素离子。本法用分光光度法测定原花青素在水解过程中生成的花青素离子。计算试样中原花青素含量。 试剂 甲醇 分析纯。 正丁醇 分析纯。 盐酸 分析纯。 硫酸铁铵 NH4Fe（SO4）2·12H2O溶液：用浓度为2mol/L盐酸配成2%（w/v）的溶液。 原花青素标准品 葡萄籽提取物，纯度95%。 仪器 4.1 分光光度计 回流装置 分析步骤 试样的制备 片剂 取20片试样，研磨成粉状。 胶囊 挤出20粒胶囊内容物，研磨或搅拌均匀，如内容物含油，应将内容物尽可能挤出。 口服液 摇匀后取样。 提取 粉状试样 称取50—100mg试样置于50mL容量瓶中，加入30mL甲醇，超声处理20min，放冷至室温后，加甲醇至刻度，摇匀，离心或放置至澄清后取上清液备用。 含油试样 称取50mg试样置于小烧杯中，用20mL甲醇分数次搅拌，将原花青素洗入50mL容量瓶中，直至甲醇提取液无色，加甲醇至刻度，摇匀。 口服液 吸取适量样液（取样量不超过1mL）置于50mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。 测定 5.3.1 标准曲线 称取原花青素标准品10.0mg溶于10mL甲醇中，吸取该溶液0、 0.1、 0.25、0.5、 1.0、 1.5mL置于10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。各取1mL测定。与试样测定方法相同。 5.3.2 试样测定 将正丁醇与盐酸按95:5的体积比混合后，取出6mL置于具塞锥瓶中，再加入0.2mL硫酸铁铵溶液和1mL试样溶液，混匀，置沸水浴回流，精确加热40min后，立即置冰水中冷却，在加热完毕15min后，于546nm波长处测吸光度，由标准曲线计算试样中原花青素的含量。显色在1小时内稳定。 分析结果表述 试样中原花青素测定结果按（1）式计算 6.1 计算： m1×v×1000 X（%）= ———————————×100 m×1000×1000 式中： X—试样中原花青素的百分含量 g/100g； m1—反应混合物中原花青素的量 μg； v—待测样液的总体积； m—试样的质量 mg。 结果表示 计算结果保留三位有效数字。 技术参数 相对标准偏差：＜10% 回收率：84.6~94.4% 。