保健食品中大蒜素的测定.doc

保健食品中大蒜素的测定 Determination of allitridum in health food 1 范围 本方法规定了保健食品中大蒜素(三硫二丙烯，C6H10S3)的测定方法。 本方法适用于以大蒜（油）为主要原料，制成的酒、胶囊、片剂中大蒜素的含量测定。 本方法最低检出浓度为0.0430mg/mL；取100mg试样，提取定容5.0mL时，试样中大蒜素最低检出质量浓度为0.20g/100g。 本方法最佳线性范围： 0.320-3.00μg。 2 原理 根据大蒜素为挥发性油成分，经有机溶剂提取，用气相色谱仪分析，采用外标法定量。 3 试剂 3.1 无水乙醇(分析纯)。 3.2 正己烷(分析纯)。 3.3 标准溶液配制 称取0.1000g标准，置于10mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度，该溶液中含大蒜素浓度为10.0mg/mL。此溶液可在冰箱中保存七天。取该溶液1.0mL，置于10mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度，此溶液含大蒜素浓度为1.0mg/mL。 4 仪器 4.1 气相色谱仪，附氢火焰（FID）检测器。 4.2 数据处理机，或积分仪。 4.3 分析天平：万分之一。 4.4 超声清洗机。 4.5 离心机，3000r/min。 5 分析方法 5.1 试样提取 5.1.1固体试样 精密称取试样0.100g，加无水乙醇2.5mL ,密塞，超声70min，取出冷却，加正己烷2.5-25.0mL定容（调节大蒜素含量约为1.0mg/mL左右），振摇，静置分层后，取上层液进样。 5.1.2 液体试样 精密吸取20.0 mL 试样，于分液漏斗中，加5mL 正己烷振摇提取1min，静置（或离心）分层后，取上层液进样。 5.2 气相色谱参考条件 5.2.1 色谱柱 玻璃色谱柱长：2米，内装担体：硅藻土（ Chromosorb W(AW)）,60-80目；固定相：0.5%己二酸乙二醇酯（Ethylene Glycol Adipate）;。 5.2.2 柱箱温度：90℃。 5.2.3 进样口温度：150℃。 5.2.4 鉴定器温度：150℃。 5.2.5 载气：氮气（55mL/min）。 5.2.6 氢气：50mL/min ；空气：500mL/min。 5.2.7 鉴定器灵敏度：2；记录仪衰减：3。 5.2.8 进样量1μL。 5.3 定性分析 在参考操作条件下，以对照品与试样比较保留时间定性。 5.4 定量分析 试样中大蒜素色谱峰面积或峰高与标准的色谱峰面积或峰高比较定量。 5.5 分析结果表述 试样中大蒜素的含量按式（5.5.1）计算。 5.5.1 计算 W= 式中：W——大蒜素的含量，%； A1——试样使用液色谱峰面积或峰高； A2——标准使用液峰面积或峰高； C——标准使用液浓度，mg/mL； V——试样定容体积，mL； m——试样的质量，g。 5.5.2 结果表示 计算结果保留三位有效数字。 6 技术参数 6.1 回收率：在不同的试样中不同浓度加标回收率为97.8-116%。 6.2 精密度：同一试样6次测定结果的RSD为2.10%。 6.3 两次测定结果相对误差：≤10% 6.4干扰因素：在超声时,注意密塞。 7 参考色谱图 图A 标准品气相色谱图 图B 片剂试样气相色谱图 图中 tr=0.588 溶剂, 图中 tr=0.6 溶剂， tr=3.045 大蒜辣素 tr=3.062 大蒜辣素tr=10.912大蒜素 tr=11.011 大蒜素