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摘要本文选用小麦抗叶锈病近等基因系
摘要
本文选用小麦抗叶锈病近等基因系TcLrl5不同叶锈菌生理小种配置亲和互作和 非亲和互作,结合钙调素(CAM)效应剂预处理和CaM基因表达分析,对小麦与叶锈 菌亲和互作和非亲和互作过程中CaM与防卫反应相关酶活性的关系以及CaM及其不同 亚型基因表达的动态变化进行研究,探讨Ca2+·CaM信使系统对小麦抗叶锈病反应的 调控作用及其亚型特异性。实验结果如下:
1.Ca2+预处理明显提高亲和互作中过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸酶(PAL)的活 性,接种后48 h时POD和PAL的活性分别提高了44.09%和17.89%;Ca2+预处理对 多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(CAT)的活性无明显影响。
2.CaM拮抗剂·三氟拉嗪(TFP) 氯丙嗪(CPZ) 和 N一(6-aminohexyl)一5一chloro一卜naphthalene sulfonamide) (W-7)预处理均可以 抑制小麦一叶锈菌非亲和互作中的POD、PAL、PPO和CAT活性。
3.TFP、CPZ和W一7浸种处理明显推迟由非亲和叶锈菌诱导的POD活性升高 的起始时间,并且在整个离体培养过程中PoD活性均比未处理对照的POD活性低。接 种120 h后TFP、CPZ和W-7预处理与未处理对照的相比,其POD活性分别降低了
35.90%、29.69%和41.67%;其PAL活性分别下降了26.01%、21.98%和19.03%; TFP、CPZ和W-7预处理后接种非亲和性菌48 h时与未处理接菌对照相比,其PPO活 性分别下降了9.42%、8.44%和12.18%;TFP、CPZ预处理的CAT活性变化趋势和 幅度与未处理接菌对照相比无明显差异,只是在接种72 h时活性分别下降22.04%、 30.22%和28.35%。
4.小麦接菌后在前12 h内CaM的四个亚型基因表达量与不接菌对照相比相差不 大。小麦接种非亲和叶锈菌后48 h、72 h、96 h时CaM.5卜J基因表达量比亲和 组合的分别高24.6%、26.6%、38.8%。小麦接非亲和叶锈菌后24 h、48 h时CaM
。铲--4基因表达量就已经分别高出亲和组合的26.8%和28.O%。但在小麦接种非亲和 叶锈菌24 h到96 h这一过程中CaM.铲誓基因表达量均低于亲和组合中CaM跖鼍基 因表达量,而CaM研Ⅺ基因表达量与亲和组合中CaM甜Ⅵ基因表达量相差不大。
5.小麦接菌后在第24 h、第48 h时非亲和组合中CaM基因表达量要高于亲和 组合中CaM基因表达量,分别高出18.1%和47.9%,而在第72 h和第96 h时非亲 和组合中CaY基因表达量又低于亲和组合CaM基因表达量。
上述结果暗示,小麦中Ca2+·CaM信使系统可能参与了小麦抗叶锈病反应,并且具
有亚型特异性。小麦中&川.妒J基因与CaMSF-4基因可能与小麦抗叶锈病相关。CaM
SF-2基因可能与小麦感叶锈病相关,而CaM SF-3基因可能不参与小麦抗叶锈病反
应。
关键词: 小麦;叶锈菌;Ca2+·CaM;CaM拮抗剂;实时定量PCR
Involvment
Involvment of Ca2+-CaM Signaling in Resistance Response of
Wheat to Its Leaf Rust Disease
Author:.Hno Jianfei Supervisors:Professor Liu Daqun
Professor Song Shuishan
Major:Plant Pathology
Abstract
The regulatory effects of Ca2+·C州signaling and the isoform specificity of C心压on the resistance response of wheat to its leaf rust disease were investigated by biochem—phamaceutical and molecular approach using the wheat isogeneic line and the suitable Puccinia triticica as materials.The results were as followings:
1.111e activities of peroxidase(POD)and phenylalanine ammonialyase(PAL)in the detached wheat leaves were increased 44.09%and 1 7.89%.respectivel
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