BmN细胞染色体及有丝分裂分如析和家蚕胚胎细胞原代培养.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 中文摘要昆虫细胞培养技术作为细胞工程基础之～，是现代实验生物学上极有价 中文摘要 昆虫细胞培养技术作为细胞工程基础之～，是现代实验生物学上极有价 ， 值的手段之一，广泛应用于生物学、医学及农业的各个领域。f昆虫细胞作为昆虫 t 杆状病毒表达系统中的工程细胞，与表达系统的转化和表达效率密切相关，因此， 昆虫细胞的研究对于表达系统的开发具有深远的影响作用。虽然以家蚕为生物反 应器的家蚕杆状病毒表达系统较之其他的昆虫表达系统来说具许多优点，具有重 大的研究意义。但家蚕细胞系因为转化和表达的效率问题，其应用并不如秋粘虫 细胞系那样广泛。因此，加强对工程细胞的生物学基础理论研究，寻找更适宜于 家蚕杆状病毒表达系统的家蚕细胞系是当前家蚕表达系统研究发展的需要。j 家蚕细胞的基础生物学研究迫待加强，而借鉴其他动物的成功经验。通过体 外细胞培养来进行研究是可行而有效的方法。同时，家蚕体外细胞培养研究的进 行，不仅可以为家蚕细胞生物学的基础理论研究提供良好的研究系统，而且在家 ， 蚕资源的开发与利用方面也具有重大的意义。 、‘ 碱研究在借鉴前人研究的基础上，一方面对现在广泛应用于家蚕杆状病毒表 达系统的工程细胞—BvaN细胞的染色体和有丝分裂进行了研究与分析。同时， 还通过原代培养实验对新的家蚕胚胎细胞系的建立进行了探索和尝试，并对家蚕 胚胎原代培养过程中出现的细胞和组织类型进行了观察、探讨与研究。 厂 ；l BraN细胞有丝分裂及染色体研究 BmN细胞是家蚕分子遗传学、细胞工程、基因工程和杆状病毒表达系统中 广泛应用的家蚕细胞，但其遗传学和细胞生物学背景知之甚少。用空气干燥法和 培养细胞贴片法对BmN细胞的染色体和有丝分裂进行研究发现： (1)采用空气干燥法制备BrnN细胞的染色体，在终浓度0．1ug／ml的秋水仙 素28C培养6～9h条件下可得到较多中期分裂相，染色体的凝集也比较适中。 (2)BmN细胞的染色体表现为典型的鳞翅目昆虫的染色体：中期染色体短 杆状或颗粒状、无明显的着丝粒。BmN细胞是高度异倍化、高度多倍化的细胞 系，其典型二倍体极少而高多倍化群达90％，最多的染色体一群在500条以上。 (3)由 (3)由BmN细胞通过空气干燥法得到的中期染色体与由家蚕生殖腺和胚胎 制备而来的减数分裂中期的染色体在形态上都冀颗粒状和短秆状，差别不大。但 是，在染色体的数目上有显著的差异。另外，染色体问豹长短差别也非常明摄。 由家蚕壅殖骤得劐静减数分袋中期染色体和殛瀚得到有熊分裂的中期染色体，其 染瞧俸长短蓑异不明显，蔼BmN维胞的中期絷色体长短非常不一致，差异非常 ?‘ 显蔫。 (4)BmN缨戆有丝努裂羰垂卷鸯缝分裂爻燕，毽窝瓣存在多穰孩骞缝分裂、 核内有丝分裂以及类似予缕续和劈裂筹螅类无丝分裂等瑗象。 2家蚕胚胎细胞的原代培养 (1)奉黟}究激家豢反转期髓齄戈材精，采瘸缓绫涣法释靛蛋翻酶半消讫法 进愆家蚕殛黪缨飚瓣爨健培券，建立了逶成反转期嚣艟缨戆蒙手℃培养懿方法，繇 壤蛋白酶半淡化法。为建立麟的塞蚕黢骆绷照系奠定了一定熬蒸毯。愿找培养翡 细胞_稷缎织块在体夕}有一定的生长现象，缎腿傣处最长存活达11个月以上。 (2)对原代培养物在壤莠过程中出现的细胞类型及变化进行了一定蛉观察 与研究，发现家蚕胚胎原代墙养中出现的细胞和组织类型生要为；上皮型细胞秘 组织、成纤维细胞和网状组织、弥散性组织、腺管组织和类脂肪组织．此外还有 少最的不常见的“豆芽”细胞和腺体样细胞。L粥一“ 7 关键词：家蚕BmN细胞染色体有丝分裂原代培养 Studies Studies Oil Chromosomes and Mitoses of BmN Cells and Primary Culture of Bomby x mori’S Embryonic Cells Abstract The mchnique of insect cell culture，one of the bases of cell engineering，is a valuable method of modern experiment biology．It was applied widely tO various fields Of biology,medicine and agriculture．As engineering cells in the insect baculovirus expression system，insect cells have close relationship with to transform and expression efficiency in the expression system．Tharefom，studi