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微生物的培养和应用
高考频度:★★★☆☆ 难易程度:★★★☆☆
下图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作,乙是平板划线法的操作结果。
下列叙述中错误的是
A.甲中涂布前要将涂布器灼烧,冷却后才能取菌液
B.对于浓度较高的菌液,如甲中的稀释倍数为102,则所得的菌落不一定是由单一的细胞或孢子繁殖而成
C.乙培养皿中所得的菌落都符合要求
D.乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端
【参考答案】C
而成,D正确。
两种纯化细菌方法的比较
项目
优点
缺点
适用范围
平板划线法
可以观察菌落特征,对混合菌进行分离
不能计数
适用于好氧菌
稀释涂布平板法
可以计数,可以观察菌落特征
吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延
适用于厌氧菌和兼性厌氧菌
1.下表为某培养基的配方,下列叙述正确的是
成分
蛋白胨
葡萄糖
K2HPO4
伊红
美蓝
蒸馏水
含量
10 g
10 g
2 g
0.4 g
0.065 g
1 000 mL
A.从物理性质看该培养基属于液体培养基,从用途看该培养基属于选择培养基
B.该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖,属于氮源的物质是蛋白胨
C.该培养基缺少提供生长因子的物质
D.该培养基调节合适的pH后就可以接种使用
2.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是
A.培养基分装到培养皿后进行高压蒸汽灭菌
B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D.培养过程中每隔一周观察三次菌落生长
3.如图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程,其中LB培养基能使菌种成倍扩增,以下说法正确的是
A.需要对活性污泥作灭菌处理
B.②中LB培养基应以甲醛为唯一碳源
C.目的菌种异化作用类型为厌氧型
D.经⑤处理后,应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养
4.聚对苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料类水瓶的重要原料,科学家发现了以PET为碳源和能量来源的细菌,该发现对PET类材料的回收利用、环境治理意义重大。请回答下列问题:
(1)实验小组欲从土壤中获取PET降解菌,需将土壤样品置于以________为唯一碳源的培养基中进行选择培养,其目的是______________。
(2)该实验小组选取PET浓度为800 mg·L-1的富集液进行系列稀释,分别取10-3、10-4和10-5倍数的稀释液0.1 mL涂布于培养基上,每个稀释倍数涂布三个平板,各平板的菌落数分别为(286、298、297),(35、32、31),(36、7、2),不适合用于计数的为________倍数的稀释液,用另外两组稀释倍数的稀释液进行计数得到的细菌数不一致的原因可能是__________________________。
(3)倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰,目的是________。在倒平板的过程中,如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,则这个平板不能用来培养大肠杆菌,原因是____________。用平板划线法纯化PET降解菌的过程中,在第二次及其后的划线操作时,须从上一次划线的末端开始划线,原因是__________。
(4)在保藏PET降解菌菌种时,可采取____________的方法进行长期保存。
1.【答案】B
【解析】分析表中成分可知,该培养基中没有凝固剂,为液体培养基,该培养基的营养成分齐全,但存在伊红、美蓝等鉴别物质,属于鉴别培养基,A项错误;该培养基中的蛋白胨既是唯一的氮源,也是碳源,而葡萄糖是绝大多数生物最常利用的碳源,B项正确;该培养基中存在的无机盐和蛋白胨中的某些物质可以看作是生长因子,C项错误;培养基调节完pH还要进行灭菌等操作后,才能使用,D项错误。
2.【答案】B
3.【答案】D
【解析】该实验是从活性污泥中分离和纯化分解甲醛细菌,则活性污泥不能灭菌,A错误;LB培养基使菌种成倍扩增,应用完全培养基培养,B错误;图示分解甲醛细菌是在培养皿中进行的,属于需氧型细菌,C错误;经⑤处理后,瓶中甲醛浓度降低,甲醛浓度最低的一组中分解甲醛细菌纯度最高,可进一步纯化培养,D正确。
4.【答案】(1)PET 增加PET降解菌的浓度,以确保能分离得到目的菌
(2)10-5 稀释倍数为10-3时,更多的菌落连在一起,最终形成单菌落,导致结果小于稀释倍数为10-4组的结果
(3)灭菌,防止微生物污染 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生 使细菌数目随着划线次数的增加而逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而成的菌落
(4)甘油管藏
【解析】(1)欲从土壤中获取PET降解菌,需将土壤样品置于以PET为唯一碳源的培养基中进行选择培养,其目的是增加PET降解菌的浓度,以确保能分离得到目的菌。(2)为了保证结果准确,一般选需要长期保存的菌种,可以采用甘油
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