平面色谱法演示文稿.ppt

* 50-* 一维单向展开方式 * 50-* * 50-* * 50-* （2）影响展开的因素和注意事项 ①环境的相对湿度 * 50-* （2）影响展开的因素和注意事项 ②溶剂蒸气的影响： 薄层色谱是固定相、液态展开剂相及展开室内的蒸气相共同构成的一个复杂的色谱分离过程。 展开室内三相之间达到平衡的程度即饱和 * 50-* 饱和操作的必要性：重现性与克服边缘现象 * 50-* 温度： 展开方式： 展距： 展开室的放置： * 50-* 结束展开：展距合适、标前沿、除溶剂 斑点定位方法： 可见光下观察 紫外灯下观察 显色剂显色： 通用：10% 硫酸乙醇溶液；碘蒸气； 专用：碘化铋钾 —生物碱； 三氯化铁 —黄酮； 茚三酮 — 氨基酸 4、展开结束与斑点定位 * 50-* 生物自显影检测系统 生物自显影检测系统 浸渍槽 浸渍槽 生物自显影检测系统 * 50-* 光学检测定位仪器 * 50-* 斑点比移值对照法：在多种展开系统中，与 标准物质进行R f 值比较。 四、薄层色谱的定性分析 * 50-* 斑点显色特征法：保存彩色图谱 四、薄层色谱的定性分析 * 50-* 薄层扫描法鉴别： 四、薄层色谱的定性分析 （1）斑点的原位光谱扫描定性 * 50-* （2）薄层色谱的全程扫描定性 * 50-* （3）薄层的三维扫描光谱图定性 * 50-* （4）与其他方法联合定性 TLC-MS联用仪： * 50-* 定量分析：半定量和定量 半定量方法：估计含量，如限量检查； 定量方法： 间接定量—— 洗脱测定 直接定量—— 薄层扫描测定：主要包括吸收扫描法和荧光扫描法 五、定量分析 * 50-* 1、薄层扫描定量分析的基本原理 （1）薄层吸收扫描法的原理：郎伯比耳定律 透射比反射线性关系好 * 50-* （2）薄层荧光扫描法的基本原理： φ为效率常数； a为吸光系数； b为薄层斑点厚度 * 50-* 2、薄层色谱扫描法定量分析方法 （1）外标法 ① 外标一点法： ② 外标二点法： * 50-* ③ 回归方程计算法： * 50-* （2）内标法 * 50-* （3）归一化法 采用该方法的条件是： 被分析的各个组分在分子量、吸收系数等性质上差别较小， 组分斑点的面积均在线性范围内， 样品中所有组分均被分离且被有效扫描。 * 50-* 1、薄层色谱扫描仪的基本构成 主机（硬件）：主机部分与分光光度计类似，由光源、分光系统、薄层板放置仓（相当于样品池）、检测器等 数据处理与信号输出系统（软件）等部分组成。 六、薄层色谱扫描仪 * 50-* 2、薄层色谱仪的扫描方法 扫描方法：一般采用双波长测定，可用反射法或透射法得到信号。 扫描方式：线形、齿形、环形扫描，多通道扫描等 六、薄层色谱扫描仪 * 50-* 薄层色谱扫描软件 * 50-* 七、薄层色谱法在药学领域的应用 在中草药与中成药分析中的应用 中药材的品种鉴别 中成药的鉴别 中药薄层指纹图谱鉴别 中草药成分分析 中成药的含量测定及质量标准研究等 薄层色谱法在合成药物分析中的应用 药典仅限于合成药的定性鉴别和纯度检查 2010中国药典二部采用TLC进行鉴别和纯度检查的品种数量共435个（约占收载总数的19%） 也用于含量测定、稳定性考察、体内药物测定及代谢研究、生化药物及抗菌素分析等。 * 50-* 专属性较强的薄层色谱鉴别技术在2005年版《中国药典》一部（中药）共收载薄层色谱鉴别1507项，而2010年版药典仅新增薄层色谱鉴别就达2494项之多，除矿物药外均有专属性强的薄层鉴别方法，TLC鉴别方法大幅度增加。 中草药与中成药的化学成分是一个复杂的体系，仅依靠显微鉴别、理化鉴别和含量测定尚无法对其复杂性进行完整的表达与描述，而指纹图谱技术则在此方面取得显著进展，现已成为中草药与中成药鉴别与质量评价的重要方法，薄层指纹图谱是重要的指纹图谱技术之一。 * 50-* * 50-* * 50-* * 50-* 上一内容 下一内容 回主目录 返回 格物致知，厚德载物 第19章 平面色谱法 * 50-* 一、平面色谱法的分类： 薄层色谱法（TLC）：将固定相于惰性硬质板上涂成一薄层，在此薄层上进行色谱分离的方法。 其原理同柱层析。 纸色谱法：属分配色谱法，固定相为吸附于滤纸上的水分，流动相一般为不与水混溶的有机溶剂。 薄层电泳法：带电荷的被分离物质（如蛋白、核苷酸、多肽、糖类等）在惰性的支持介质（如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶等）上，以不同泳动速度向相反电