紫外可见分光光度法教学课件.ppt

* 来源：散射源于吸光质点；反射源于入射光在吸收池内外界面之间通过。 结果：发射率大，透射光强度减弱，使A偏高。 消除：可空白补偿，但混浊液或空白液与试液的折射率相差较大则不能完全补偿。其依据是菲涅耳定律： 反射光和散射光的影响 反射率： * 非平行光的影响 通过吸收池的光为倾斜光：实际光程 l 变长，导致 A值计算偏差。 现有仪器一般都不能真正实现通过吸收池的光为真正的平行光。 光程的变异：是同一样品在不同仪器上测量吸收系数产生差异的主要原因之一。 要求比色皿要成对使用 * 暗噪音（dark noise）：与光信号无关，由检测器、信号放大电路等仪器部件产生，同台仪器ΔT可视为常量。 散粒噪音（signal shot noise）：与光信号强弱变化有关，也称信号噪音。由光敏元件在每单位时间内电子迁移数量的不确定性引起。 （3） 仪器因素：透光率测定误差ΔT * 测定结果的相对误差 ΔC 与透光率测定误差 ΔT 的关系： 微积分并除以上式，得： * 当 ΔT = ±0.01 ，即透射率测量误差为1%时： ΔC/Cmin =?0.4343ΔT/(T lgT) = ?0.4343×(±0.01)/[0.368×(-0.4343)] = ± 2.73% 导函数取零值 Tmin=0.368 Amin=0.4343 △ T= 0.01 △ T= 0.005 △ T= 0.001 △ T= 0.0005 △ T= 0.0001 最佳的吸光度范围 A＝0.2~0.8；T：20%～65% ΔC/C=?0.4343 ΔT/(T lgT) 结论：根据仪器性能和实际测量结果确定适宜测量范围 计算例题： 测定某铜的有色络合物溶液，ε = 2.00×105。铜离子c = 5.0×10-7～5.0×10-6mol/L，l = 1cm。求 （1）A 和 T 的测量范围； （2）若T 的读数误差⊿T = 0.005，可能引起的测量相对误差为多少？ T1、T2 * 吸收定律小结： 朗伯比尔定律关系曲线 吸光系数 吸光度的加合性 吸收定律的适用前提 偏离吸收定律的因素 * 芳香族化合物的紫外吸收带 * 四、影响吸收带的因素 （重难点） 影响因素 内因-结构因素 外因-测试环境 共轭与位阻 跨环效应 取 代 基 异 构 化 溶剂效应 体系 pH 浓 度 温 度 * 1、共轭与位阻：红移且强度增大 π共轭：明显 超共轭：微小 * 位阻效应会影响共轭程度 顺式：位阻大 ?max=280nm（ε=10500） 反式：位阻小 ?max=295.5nm（ε=29000） * 2、跨环效应 使n→π*越迁的R吸收带长移，强度增加。 类似于空间远程共轭 * 3、取代基的影响 助色团：因p-π共轭红移,增效 如-NH2、-OH、-Cl。 苯环或烯烃上的H被各种取代基取代，多产生较小红移。强度视取代基而定. 实例:教材p185表10-1 * 4、异构化作用 因结构不同而不同 如，含水CH3CHO有两种可能的结构 ： I. CH3CHO–H2O II. CH3CH(OH)2 已烷：有醛基吸收带?max=290nm,结构I 水溶液：无醛基吸收带，结构II * 5、溶剂的影响： 随溶剂极性增加： n-?*跃迁：R带蓝移 ?-?*跃迁：红移。 光谱形态：更加平滑，精细结构消失 提示：慎重选择测试样品的溶剂 溶剂UV吸收峰不干扰待测化合物 不与样品发生反应 * 溶剂影响的理论解释： 实例：溶剂对丙酮紫外光谱的影响 * 教材： p187 表10-2 练习1： * 在下面五种溶剂中测定化合物的 n-?* 跃迁，吸收带波长最长者是： A：环已烷　　　B：氯仿　　　 C：甲醇　　　 D：水　　　 E：二氧六环　 答案：环己烷（极性最弱） 练习2： * 紫外光谱一般都用样品的溶液测定，溶剂在所测定的紫外区必须透明，以下溶剂哪些能适用于210nm以上？ A：95％乙醇　 B：水　　 C：四氯化碳　　D：正己烷　　　 E：乙醚 答案：正己烷（最大吸收波长小于200） * （2）pH值影响 * 室温：影响不大 低温：吸收峰红移，尖锐，强度增大 分子热运动减弱，分子间能量交换少 高温：分子碰撞频率增加，导致谱带宽，精细结构消失。 （3）温度的影响 （4）浓度的影响 浓度过高光谱形态改变：分子解离、缔合、互变异构等使物质存在状态发生变化。 * 五、朗伯-比尔定律 布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系: