食品中志贺氏菌的检测——分离及培养.pptVIP

— 1 — 志贺氏菌的分离及培养部分培养基 一 志贺氏菌的分离及培养工具和设备 二 食品营养与检测专业教学资源库 目录页 志贺氏菌的分离及培养 三 — 2 — 食品营养与检测专业教学资源库 过渡页 志贺氏菌的分离及培养部分培养基 一 — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 培养基和试剂 名称 物料名称 用量 配制说明 注意事项 麦康凯（MAC）琼脂 蛋白胨 20.0 g 将以上成分混合加热溶解，冷却至25 ℃左右校正pH 至7.2±0.2，分装，121 ℃高压灭菌15 min。冷却至45 ℃～50 ℃，倾注平板。 如不立即使用，在2 ℃~8 ℃条件下可储存二周 乳糖 10.0 g 3 号胆盐 1.5 g 氯化钠 5.0 g 中性红 0.03 g 结晶紫 0.001 g 琼脂 15.0 g 蒸馏水 1 000.0 mL — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 培养基和试剂 名称 物料名称 用量 配制说明 注意事项 木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂 酵母膏 3.0g 除酚红和琼脂外，将其他成分加入400 mL 蒸馏水中，煮沸溶解，校正pH 至7.4±0.2。另将琼脂加入600 mL 蒸馏水中，煮沸溶解。 将上述两溶液混合均匀后，再加入指示剂，待冷至50 ℃~55 ℃倾注平皿。 本培养基不需要高压灭菌，在制备过程中不宜过分加热，避免降低其选择性，贮于室温暗处。本培养基宜于当天制备，第二天使用。使用前必须去除平板表面上的水珠，在37 ℃～55 ℃温度下，琼脂面向下、平板盖亦向下烘干。另外如配制好的培养基不立即使用，在2 ℃~8 ℃条件下可储存二周。 蔗糖 7.5 g 木糖 3.75g 乳糖 7.5g 脱氧胆酸钠 1.0 g 柠檬酸铁铵 0.8 g 硫代硫酸钠 6.8 g 氯化钠 5.0 g 琼脂 15.0 g L-赖氨酸 5.0g 酚红 0.08 g 蒸馏水 1 000 mL — 2 — 食品营养与检测专业教学资源库 过渡页 志贺氏菌的分离及培养工具和设备 二 名称 条件 恒温培养箱 36 ℃±1 ℃ 无菌吸管 1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头 无菌培养皿 直径60mm,90mm 接种环、试管 无菌 无菌均质杯或无菌均质袋 容量 500 mL — 2 — 食品营养与检测专业教学资源库 过渡页 志贺氏菌的分离及培养 三 — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 取增菌后的志贺氏增菌液分别划线接种于 XLD 琼脂平板和 MAC 琼脂平板或志贺氏菌显色培养基平板 上，于 36 ℃±1 ℃培养 20 h～24 h，观察各个平板上生长的菌落形态。宋内氏志贺氏菌的单个菌落直径大 于其他志贺氏菌。若出现的菌落不典型或菌落较小不易观察，则继续培养至 48 h 再进行观察。 ? 分离及培养 — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 选择性琼脂平板 志贺氏菌的菌落特征 MAC 琼脂 无色至浅粉红色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐 XLD琼脂 粉红色至无色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐 志贺氏菌属显色培养基 按照显色培养基的说明进行判定 不同培养基的菌落特征 * * * * * *