HPLC同时测定栀子金花丸中黄芩苷_大黄素_大黄酚的含量.docVIP

通讯作者:雷小红Tel-mail: 櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊 164565609@qq．com 4贺金山,施金川,连秋燕．首乌芪灵胶囊质量标准的探讨和急性毒性试验[J]．福州总医院学报,2005,12(4:274-276 5曹妹芳,李世芳．复方补肾颗粒的质量标准研究[J]．中成药, 2003,25(3:193-196 6张义萍,陈建真,敖志辉．麦冬不同种属、产地和部位的活性成分 研究进展[J]．中国实用医药,2008,3(10:191-193 7张玉斌,李其凤．参芪养生膏的质量标准研究[J]．时珍国医国药,2003,14(1:9-10 (2012-03-20收稿2012-05-28修回 HPLC同时测定栀子金花丸中黄芩苷、大黄素、大黄酚的含量雷小红(怀化市食品药品检验所湖南怀化418000 摘要目的:建立高效液相色谱法测定测定栀子金花丸中黄芩苷、大黄素、大黄酚的含量。方法:色谱柱为Diamonsil C 18 (250mm?4．6mm,5μm;流动相为甲醇-0．4%磷酸溶液,采用梯度洗脱;检测波长为254nm:柱温:室温,流速:1．0ml·min－1。结果:黄芩苷进样量在0．154 1．540μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0．9996,平均回收率为100．2%,RSD= 1．5%(n=9;大黄素进样量在0．071 0．714μg范围内与峰面积线性关系良好,r=1．0000,平均回收率为99．7%,RSD= 1．2%(n=9;大黄酚进样量在0．147 1．472μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0．9998,平均回收率为100．0%,RSD= 1．2%(n=9。结论:该方法简便、准确、重复性好。 关键词高效液相色谱法;梯度洗脱;栀子金花丸;黄芩苷;大黄素;大黄酚 中图分类号:R927．2文献标识码:B文章编号:1008-049X(201208-1202-02 栀子金花丸由栀子、黄芩、大黄、知母、黄连、黄柏、金银花、天花粉等八味制成的丸剂,具有清肝泻火,凉血解毒的功效。用于肺胃热盛,口舌生疮,牙龈肿痛,目赤眩昏等[1]。本文采用高效液相色谱法,用梯度洗脱对黄芩中的黄芩苷、大黄中的大黄素、大黄酚进行含量测定。 1仪器与试药 1．1仪器 Aggilent1260高效液相色谱仪(G1311C四元泵、G1329B 进样器、G1316A柱温箱、G1314F紫外检测器;KQ-250DE 型数控超声波清洗器;瑞士梅特勒AB135-S电子分析天平;湘仪AEU-210电子分析天平。 1．2试药 黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号: 200111、大黄素对照品(中国药品生物制品检定所,批号: 200110、大黄酚对照品(中国药品生物制品检定所,批号: 796-9404;甲醇(色谱纯,TEDIA,水为超纯水、其余试剂均为分析纯;栀子金花丸(山东孔圣堂制药有限公司,批号: 091076、090604、090121,9g/袋 2方法与结果 2．1色谱条件与系统适用性 色谱柱Diamonsil C18(250mm?4．6mm,5μm;流动相为甲醇-0．4%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长为254nm:柱温:室温,流速:1．0ml·min－1。理论板数:以黄芩苷计算应不低于4000;以大黄素计算应不低于3500,和大黄酚计算应不低于4000。 2．2供试品溶液的制备 取本品适量,研细,取约1．0g,精密称定,置锥形瓶中,精密加入50%甲醇50ml,密塞,称定重量,超声处理20min,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,备用。 2．3对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥16h的黄芩苷对照品15．40mg,置100ml,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液;大黄素、大黄酚各7．14mg、14．72mg分别置100ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液;分别吸取上述三种贮备液各5ml,混匀,作为混合对照品溶液。 2．4阴性样品的制备 取缺黄芩、大黄的阴性制剂适量,按供试品溶液制备方法制备成阴性样品溶液。 2．5干扰试验 取对照品溶液、样品溶液、阴性样品溶液,按上述色谱条件,分别进10μl,测定,结果见图1。由图可见,样品色谱中与对照品溶液在相同的保留时间内(t R=5．3、t R=18．1、t R= 21．8有相似的色谱峰而阴性样品无这些峰,且样品中黄芩苷、大黄素、大黄酚与其他峰可达到基线分离,分离度大于1．5,结果表明阴性样品无干扰。 2．6线性关系考察 分别精密吸取混合对照品溶液3．0,5．0,10．0,15．0,30μl 分别注入液相色谱仪,测定峰面积,以进样量(X,μg为横坐标,峰面