DBS22015-2013食品安全地方标准水产品中炔诺酮的测定ELISA法.pdfVIP

DBS22 吉 林 省 地 方 标 准 DBS22/015—2013 食品安全地方标准 水产品中炔诺酮的测定 ELISA 法 2013 -10-08 发布 2013 -10 - 08 实施 吉林省卫生厅 发 布 DBS22/015—2013 食品安全地方标准 水产品中炔诺酮的测定 ELISA 法 1 范围 本标准规定了水产品中炔诺酮的酶联免疫测定方法。 本标准适用于水产品中炔诺酮的快速筛选检测。 本标准的检出限为2 µg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本 （包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规则和试验方法 SC/T 3016 水产品抽样方法 3 原理 利用ELISA抗原抗体的特异性反应，样本中残留的炔诺酮和预包被的偶联抗原竞争炔诺酮抗 体，加入酶标二抗显色后，样本吸光值与其所含残留物炔诺酮的含量成负相关，外标法定量。 4 试剂与材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，试验用水符合GB/T 6682一级水的标准。 4.1 亚硝基铁氰化钠 （C FeN Na O.2H O）。 5 6 2 2 4.2 硫酸锌 (ZnSO.7H O) 。 4 2 4.3 乙腈。 4.4 氢氧化钠。 4.5 0.36 moL/L 亚硝基铁氰化钠溶液:称取 10.7 g 亚硝基铁氰化钠加 100 mL 水溶解混匀。 4.6 1 moL/L 硫酸锌溶液:称取 28.8 g 硫酸锌加 100 mL 水溶解混匀。 4.7 0.1 moL/L 氢氧化钠溶液:称取 0.4 g 氢氧化钠加 100 mL 水溶解混匀。 4.8 乙腈-0.1 moL/L 氢氧化钠溶液:量取 84 mL 乙腈加入到 16 mL 0.1 moL/L 氢氧化钠溶液中混匀。 4.9 试剂盒提供试剂包括：96 孔酶标板、标准液、高浓度标准品、酶标二抗、抗体工作液、底物液、 终止液、浓缩洗涤液、浓缩复溶液。 4.10 刻度移液管：10 mL。 4.11 洗耳球。 4.12 玻璃试管：10 mL。 4.13 聚苯乙烯离心管：2 mL、50 mL。 1 DBS22/015—2013 5 仪器与设备 5.1 酶标仪或酶联免疫分光光度计(450 nm) 。 5.2 天平：感量 0.01 g。 5.3 洗板机。 5.4 旋转蒸发仪/氮气吹干装置。 5.5 均质器。 5.6 振荡器。 5.7 涡旋仪。 5.8 离心机(4000r/min) 。 5.9 微量移液器：单道 20 µL～200 µL、100 µL～1000 µL、多道 250 µL。 6 测定方法 6.1 制备与保存 6.1.1 抽样：按 SC/T 3016-2004 的方法进行。 6.1.2 保存：样品经处理后，取可食部分 （苗种取全身）100 g，用均质器捣碎，装入样品袋，标明标 记，放