DBS13009-2017食品安全地方标准小麦粉中偶氮甲酰胺的测定高效液相色谱法.pdfVIP

DBS13 河 北 省 地 方 标 准 DBS13/009—2017 食品安全地方标准 小麦粉中偶氮甲酰胺的测定 ——高效液相色谱法 2017-11-08发布 2018-02-01实施 河北省卫生和计划生育委员会 发布 DBS13/009—2017 食品安全地方标准 小麦粉中偶氮甲酰胺的测定—高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了小麦粉中偶氮甲酰胺的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于小麦粉中偶氮甲酰胺含量的检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适 用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 5009.1 食品卫生检验方法 理化部分 总则 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 原理 样品中的偶氮甲酰胺用丙酮进行提取，经浓缩、脱脂、过滤后，高效液相色谱法测定， 外标法定量。 4 试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T 6682一级水要求。 4.1 乙腈：色谱纯。 4.2 丙酮：色谱纯。 4.3 正己烷：色谱纯。 4.4 磷酸。 4.5 磷酸氢二钾（KHPO ·3HO）。2 4 2 4.6 辛烷磺酸钠。 4.7 标准品：偶氮甲酰胺 （CHNO，CAS号：123-77-3）纯度大于或等于99%。 2 6 6 2 4.8 色谱柱1：C 柱，柱长250 mm，内径4.6 mm，粒径5 µm，或相当者。 18 4.9 色谱柱2：氰基（CN）柱，柱长250 mm，内径4.6 mm，粒径5 µm，或相当者。 4.10 10mmol/L辛烷磺酸钠-5mmol/L磷酸氢二钾溶液：称取 1.08g辛烷磺酸钠（4.6）， 0.57 g磷酸氢二钾（4.5）加水溶解并定容至500 mL，用磷酸（4.4）溶液调节pH至3.5。 4.11 5mmol/L磷酸氢二钾溶液：称取0.57g磷酸氢二钾 （4.5）加水溶解并定容至500mL。 1 DBS13/009—2017 4.12 标准储备液：准确称取适量偶氮甲酰胺标准品（4.7），用5 mmol/L磷酸氢二钾溶液 （4.11）或水溶解并配制成含偶氮甲酰胺100 mg/L 的标准储备液，现用现配。 注：使用色谱柱1用5 mmol/L磷酸氢二钾溶液（4.11）溶解，使用色谱柱2用水溶解。以下标准工作液和 样品液的定容溶剂与本条相同。 4.13 基质标准工作液：准确移取一定体积的标准储备溶液（4.12），用空白样品处理液稀 释成浓度适当的标准工作液，现用现配。 4.14 微孔滤膜：0.45 µm，水系。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。 5.2 高速离心机。 5.3 超声波振荡器。 5.4 旋转蒸发仪。 %.1 涡旋混合器。 5.5 离心管。 5.6 分析天平：感量分别为0.01 g和0.1 mg。 6 分析步骤 6.1 样品制备 试验前应将获取的样品充分混匀，样品制备方法按GB/T 5009.1执行。 6.2 样品处理 称取小麦粉样品2g （精确至0.01g）于50mL具塞离心管中，加入15mL 丙酮（4.2） 超声振荡提取 15 min，在7000 r/min下离心5