生物化学之核酸结构和性质.pptVIP

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  • 2019-11-27 发布于广东
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② 测无机磷量:不经消化,定磷比色测定,查标准曲线,得无机磷量。 ③ 核酸含量测定:=(总磷量—无机磷量)×10.5=K×(A660总磷-A660无机磷)×10.5 (2)定糖: 核糖和脱氧核糖特殊的呈色反应。 RNA:RNA(+ 浓硫酸,加热)?核糖?糠醛(+地衣酚、CuCl2或FeCl3)?鲜绿色(670-680nm处呈现最大光吸收) DNA :DNA(+ 浓盐酸,加热)?脱氧核糖(+ 二苯胺 + 浓硫酸)? 蓝色物质(在595-620nm处呈现最大光吸收) 2、DNA纯度鉴定 (1)紫外吸收法: (2)凝胶电泳法:琼脂糖凝胶电泳 迁移率:——分子量(lgMr与迁移率成反比); ——DNA的构象 根据A260/A280的比值判断核酸样品的纯度 纯DNA:A260/A280=1.8 纯RNA:A260/A280=2.0 (若样品中含有杂蛋白,则A260/A280比值明显降低) 六、核酸的分子杂交技术 ? Southern印迹(Southern biotting) DNA经酶解和电泳分离后,将其片段→硝酸纤维素滤膜或尼龙膜,用同位素标记的DNA(或RNN)探针与之杂交,通过放射自显影,以探测目的片段的存在及片段长度。 习题 一、填空题 1.核酸的基本结构单位是______。 2.DNA双螺旋中只存在____种不

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