病毒感染和宿主免疫病毒感染实验室诊疗技术应用.pptVIP

动物接种试验 敏感动物 适宜途径 观察指标 新分离病毒的鉴定 1、病毒核酸类型的测定 2、病毒理化性状的检测 3、病毒的血清学鉴定 病毒的血清学检测 方法： 中和试验 补体结合试验 血凝及血凝抑制试验 凝胶免疫扩散 免疫组织化学法 ELISA法及其他 中和试验： 原理— 用特异性抗体中和病毒 的致病性或感染性的试 验。 用途— 鉴定病毒、分析病毒抗原 的性质、免疫血清的抗体 效价、疫苗接种疗效以及 待检样本中的抗体辅助诊 断。 补体结合试验： 原理— 特异性病毒抗原与相应抗 体结合形成免疫复合物时 能结合补体。 用途— 流行病学调查 （操作繁琐、特异性低、 维时短，呈淘汰趋势） 血凝及血凝抑制试验： 原理— 某些病毒或病毒血凝素能 选择性地引起个别种类的 哺乳动物的RBC凝集（血 凝），当加入相应的特异 性抗体时，上述凝集现象 被抑制（血凝抑制）。 用途— 病毒鉴定、病毒分型、辅助 诊断。 机理 结果 原理： 结果 凝胶免疫扩散： 原理— 以半固体琼脂糖为载体， 在其上面进行抗原、抗体 的沉淀反应。 用途— 病毒鉴定、辅助诊断等 （被新型方法、技术替代） 相同 不同 交叉 免疫组织化学法： 原理— 利用标记抗体直接对样本 中病毒抗原的存在与否进 行检测；标记抗体为特异 性抗体（一抗）时，称直 接法，标记抗体为二抗时 则称间接法。 （荧光、酶或放射性同位素等） 用途— 检测标本中的病毒抗原， 可对病毒抗原作定性的同 时可抗原作定位和分布的 分析。 酶联免疫吸附试验： 原理— 用酶标记的抗体或抗抗体 （二抗）来检测标本中病 毒抗原或血清中病毒抗体 用途— 检测病毒特异性抗原或抗 体，疾病辅助诊断。 其他： 发光免疫分析技术 固相放射免疫测定 胶体金标记免疫层析 等等 病毒的分子生物学检测 分子杂交技术： 原理— 利用DNA双链分子的碱 基是互补的，在高温和 变性剂存在时可解链， 遇低温时又可复性（双 链）的特性，在复性时 加入示踪物～ 常用的方法： 斑点杂交 固相杂交 原位杂交 Southern/northern 印迹 分支DNA技术 常用技术： 巢/半巢式PCR 多重PCR 逆转录PCR（RT-PCR） 定量PCR 原位PCR RNA捕获PCR等 干扰素的生物效应 1、具严格种属特异性 2、Ⅰ型抗病毒作用强，具广泛 性；Ⅱ型抗肿瘤、免疫调节 作用强（活化NK、Tc；增加 MIC-Ⅰ类分子；抑制DNA合 成）。 特异性抗病毒免疫 （一）体液免疫的抗病毒作用 （二）细胞免疫的抗病毒作用 （三）抗病毒免疫应答的形成 和持续时间 （四）免疫病理作用 体液免疫的抗病毒作用 1、具有抗病毒作用的免疫球蛋白 IgM