色谱定量参数处理基础.pptVIP

色谱定量参数处理基础 数据处理参数 峰处理参数：SLOPE，WIDTH，DRIFT， T.DBL 峰积分标记：E，S，T，V，L 定性参数：时间窗％，时间带 定量参数：METHOD，ID表 显示参数：ATTEN 峰处理参数 判断峰起点 滤除低平噪声（如蛇行等） SLOPE的确定：通过SLOPE TEST进行，测定时间为 10倍WIDTH的时间。 默认值： 填充柱：200 毛细管柱：500 峰处理参数 去除高频噪声 数据采集速度，WIDTH/10采一次数据 控制S.TEST时间，斜率测试时间为10×WIDTH 注：填充柱，峰宽：5 S 毛细柱，峰宽：2～3 S 峰处理参数 峰处理参数 设定值为0时，积分仪自动判断； 不使用时可设为1000。 积分峰标记（MK） E：超量程峰 S：拖尾峰（一般指溶剂峰） T：尾上峰，作过拖尾处理的峰 V：与前邻峰垂直分割 L：前沿峰 定性参数 保留时间允许误差： 时间窗％ ，相对法 设定简单，但所测组分保留时间跨度大时，不易设定 时间带，绝对法 设定较繁，需逐一设定 定量参数 校正级别 单级校正 多级校正 单级校正 对每一组分仅做一级校正（可以是多次分析同一浓度的标样，取其平均值） 组分响应值大小随浓度变化而呈线性变化时才可使用单级校正 单级校正曲线必须通过原点 单级校正 制备一个混合标样或各组分单独标样，浓度应尽可能接近实际样品中各组分的浓度 分析标样 建立校正表（ID表） 分析待测样品并使用校正表进行校正计算，得到待测样品中各组分的浓度 需要时进行再校正 多级校正 对每一组分至少作两个不同浓度水平的校正 当组分响应值随浓度变化而呈非线性变化时须使用多级校正 校正曲线可以不通过原点 多级校正 制备一系列不同浓度的混合标样，其浓度范围应包含实际样品中各组分的浓度 依次分析各级工作标样 建立多级校正校正表（ID表） 分析待测样品并使用校正表进行校正计算，得到样品中各组分的浓度 需要时进行再校正 定量参数 面积归一化法 校正面积归一化法 外标法 内标法 面积归一化法 公式： 校正面积归一化法 公式： 式中：Fi为校正因子， Fi＝浓度（含量）/面积 外标法 公式： 内标法 公式： 内标法 样品中无该组分 色谱性质稳定 化学性质与所测组分相似 不会与样品发生反应 内标物浓度应适当，峰面积比值在0.7～1.3范围内 定量方法 No Calculation： 只画图，不计算 Normalization： 面积归一化法 Corrected Normalization：校正面积归一化法 Internal Standard： 内标法，内标峰ID设为1号 External Standard：外标法 Corrected Normalization with Factor：带修正系数的归一化法 Exponential Calculation：指数计算法 Multi-internal Standard：多内标法 HPLC Business Dept Shimadzu Corporation SLOPE：10倍Width的所有信号的总和，用于： WIDTH：半高峰宽，用于： DRIFT：判断相邻峰的积分方式 注：1）设定值为0时，积分仪将自动判断 2）如DRIFT与基线至峰谷连线较接近时，积分将 不稳定，导致面积值变化较大，需加以注意。 T.DBL：峰展宽一倍所需要的时间 举例：T.DBL＝10min，则 Rt＝10min时，峰宽变为2×WIDTH， 斜率变为SLOPE/2 Rt＝20min时，峰宽变为4×WIDTH， 斜率变为SLOPE/4 标记： 单级校正 单级校正过程 多级校正 多级校正过程： 校正方法 优点： 1）无需做校正，简便，快速 2）进样量不严格要求 缺点： 1）所有组分都流出且被检测到 2）所有组分的检测灵敏度都相同 优点： 进样量不严格要求 缺点： 1）所有组分都流出且被检测到 2）所有组分都需作校正 优点： 1）不需所有峰都流出或被检测到 2）只对所测组分作校正 3）可以校正检测器的非线性响应（多级校正） 缺点： 1）进样量必须准确 2）仪器必须有良好的稳定性 优点： 1）进样量不严格要求 2）只对所测组分作校正 3）可以校正检测器的非线性响应（多级校正） 缺点： 1）必须在样品中加一内标组分 2）操作较为繁琐 选择内标物的标准： HP