药物半数致死量 LD50的测定.pptVIP

药物半数致死量(LD50)的测定 概念 药物半数致死量（lethal dose 50%, LD50）：是指能够引起试验动物一半死亡的药物剂量，通常用药物致死剂量的对数值表示。 毒性试验 急性毒性试验 长期（慢性）毒性试验 特殊毒性试验（致畸、致癌、致突变） 意 义 图1表示的是药物给药剂量与动物死亡率间的关系，随着药物剂量的增大，死亡率也随之加大，剂量小于A时，动物全部生存，剂量等于B时，动物有半数死亡。剂量大于或等于C时动物全部死亡。图1中ABC称为剂量反应曲线。这条曲线的特点是:(1)死亡率为50%时(即LD50)的斜度最大，B位于曲线中央，此处灵敏度最高。（2）曲线两端平坦，接近0%和100%附近灵敏度最差。 为了使曲线的特点更明显，将图1的横坐标剂量改为剂量的对数时，可得到一对称的S型曲线(图2) 死亡百分率 剂 量 剂 量 对 数 A B C A’ B’ C’ 死亡百分率 测定LD50意义 (1)是衡量药物毒性大小的指标，评价药物优劣的重要参数 (2)评价药物安全性---治疗指数 (3)申报新药过程中必须提供的药理学资料 TI=LD50/ED50 新药审批办法规定： 三、药理资料 13. 与功能主治有关的主要药效学试验资料及文献资料。 14. 一般药理研究的试验资料及文献资料。 15. 动物急性毒性试验资料及文献资料。 16. 动物长期毒性试验资料及文献资料。 17. 致突变试验资料及文献资料。 18. 致癌试验资料及文献资料。 19. 生殖毒性试验资料及文献资料。 测定方法 LD50的测定方法有很多。如：目测机率单位法、加权机率单位法(Bliss?法)、寇氏法、序贯法等。 Bliss?法是目前推荐使用的方法。此法对剂量分组无严格要求，不需要剂量组有0%和100%死亡率，是目前公认最准确的测定方法。但本法计算繁琐，故现多采用计算机程序计算。 我国卫生部规定，Bliss法是作为新药LD50测定评定必须采用的方法。 本实验采用Bliss法程序计算LD50及其它相关参数。 【实验目的】 1.掌握药物的半数致死量测定的意义、方法、计算过程。 2.了解药物给药后动物所产生的毒性反应及其严重程度，为临床安全用药及监测提供一定的参考。 实验原 理 硫酸镁注射给药：拮抗Ca2+作用 抑制骨骼肌 肌松 呼吸抑制 抗惊厥 松弛血管平滑肌 降低血压 抑制中枢神经系统 感觉及意识消失 血镁过高可引起呼吸抑制、血压骤降、心跳骤停而致死。 【实验动物、器材和药品】 实验动物：小白鼠，体重18～２２g，♀♂各半，实验前禁食6-8h,不禁水。 实验器材：计算机（BL-420E+机能实验系统）、粗天平、注射器（1ml）、小鼠笼。 实验药品：10%硫酸镁 【实验方法】 预备实验 1．探索剂量范围：根据经验或文献，通过实验找出100%死亡的最小剂量及0%死亡的最大剂量。此即上下限剂量（Dm，Dn）。 2．确定组数、计算各组剂量： 组数（n）：5组 按公式求公比r: 按公比求各组剂量：D1，D2，…,Dn，其中D1= Dn=最小剂量、 D2= D1·r ,…，Dn= Dn-1·r, Dm =最大剂量 3.预试中Dm=167mg/kg Dn=92mg/kg， r=1.11 正式实验 1．分组编号:取小鼠60只，随机分成6组，每组10只，♀♂各半。 2．称重给药：按如下剂量给药，由腹腔注射给药。 3．观察记录：记录小鼠给药后反应，记录死亡时间，统计死亡数，列下表： 组别 剂量 (mg/kg) 给药量 （ml/10g） 动物数 （只） 死亡数 1 2 3 4 5 6 167 152 137 122 107 92 0.167 0.152 0.137 0.122 0.107 0.092 10 10 10 10 10 10 4.数据统计 5.计算LD50及其95%可信限 采用Bliss法程序计算各参数步骤： 启动微机，运行BL-420E+程序，进入其数据处理选项，再进入半数致死量选项。 一次输入各组剂量、动物总数、动物死亡数等相关数据。 单击“计算”按钮，计算LD50等参数。 实验结果 计算LD50 95%可信限是多少?