原子吸收光谱基本原理与实验准备.pptVIP

2. 生物标准参比样品的建立及微量元素分析的质量控制 由于生物样品基本组成复杂,待测元素含量较低,使得准确测定存在很大困难,致使测定值与文献值相差悬殊,这个问题可以通过标准参比样品的使用来克服。一些国际机构如国际原子能委员会(IAEA)及国家机构如美国国家标准局(NBS)等,已研制出一些生物样品标准参比物质,如标准牛血清、牛肝、全血、人发、尿等等,这对保证数据的准确性和可比性,起了很大作用.目前我国这方面工作也取得不少进展。如中国预防医学科学院环境卫生监测所研制的牛血清、商业部研制的猪肝标样。上海原子核所研制的头发标样等都相继问世。 在每批样品分析中,选用1~2个与被测样品性质组成相似的标准参比样品进行质控,以增加分析结果的可靠性、可信性。在分析工作中常受到偶然因素的影响,使结果产生误差,而实验室质控的作用,就是当分析工作中出现误差时,能及时发现问题,以便采取措施,保证获得最佳分析结果。 在这里需特别指出的是控制污染是保证检测结果可靠性的首要条件,由于生物样品中微量元素的含量极低,一般在百万分之一~亿万分之一,而我们周围环境中某些元素又广泛存在着,因此,在微量元素研究中,采样工具、器皿、试剂、甚至空气等都可能是污染源。 以血清铬的分析值为例,检测结果在20世纪50年代为185ng/ml,60年代为70ng/ml,70年代为1~10ng/ml,现在仍有下降的趋势。30年中血清铬数值下降了3个数量级。造成血铬值偏高的污染因素很多,原因之一是由于采血时没有注意到不锈钢针头溶出铬的问题。临床上大量使用的橡皮膏、乳胶管往往会对锌的测定造成污染。微量元素分析的各种试剂如酸类等,尽可能使用高纯度的,此外,空气中的灰尘、烟雾等也会给测试结果带来影响有条件的实验室应在超净工作间处理样品。分析人员也应注意自身污染情况,如手上的皮屑,表皮污垢,汗和皮脂等污染源。 3 样品前处理技术 (1) 标准溶液及其配制原则 在原子吸收光谱分析中,水是最普遍使用的溶剂,对其纯度要求较高,通常采用去离子交换水或去离子重蒸溜水,应用无焰法进行ppb或ppt级的微量元素分析,则要用高纯度的水,现多采用石英亚沸点高纯水蒸馏器制取高纯水。 无机酸也是常用的 溶剂,其中常含有少量金属元素,使用前应严格检查.在日常分析中,一般可用优级纯的酸,在条件可能情况下,最好用超纯酸。 对选用的试剂,以不玷污待测元素为原则。在实践中,如果在仪器灵敏度范围内,检测不出待测元素的吸收信号,就可认为所选试剂没玷污待测元素。 配制标准溶液时,应使标准溶液的组分要尽可能与试样溶液相似。溶液中总含盐量是影响雾化和原子化效率的主要因素之一,其影响大小与盐类性质、含量、火焰温度、雾珠大小有关。如果试样中总含盐量在1%以上时,在标准溶液中就应加入等量的同一盐类,以期在雾化时和在火焰中所发生的过程相似。应用无火焰法保持标准与基体一致更具实际意义。 原子吸收分析用的标准溶液(储备溶液)浓度一般为1mg/ml,有些元素的标准溶液需加入少量无机酸以利储存,浓度1ug/ml的标准溶液要现用现配。用来制作标准曲线的标准系列溶液的浓度范围,原则上根据标准曲线范围和试样中待测元素的浓度确定,整套标准溶液的浓度应把试样溶液的浓度包括在其范围内。不同元素其灵敏度不同,标准系列溶液的浓度范围也不相同,对于常规分析,从测量精度来看,最佳的浓度范围的吸光值为0.1~0.6,而微量元素的测定,浓度下限的吸光值0.1。 (2) 生物材料样品的采集 生物临床分析样品,按其制备的难易程度可分为五种类型：1) 全血、血清、血浆、红血球、白血球；2) 尿; 3)毛发、指甲；4) 肝、肾等软组织； 5)骨骼、牙齿。 血清、血浆、全血、尿以及人发中常量元素和微量元素的含量及分布,是新陈代谢失调的最可靠的信息。血液的采集部位和采样体积取决于人的年龄、分析元素的性质及含量,也取决于样品处理方法和最终测定方法.末梢血液可以从耳垂穿刺或手指采取,若需血样量较大,则最好从静脉采血。1%肝素钠水溶液、柠檬酸或柠檬酸铵可作为血液的抗凝剂。 尿的临床分析,以早晨首次排出的尿最为合适,它是夜间积存在膀胱内的,是24h内最浓缩的尿,也是各日间性质上差别最小的尿样。 毛发中元素的含量与取样部位及离发根的距离有关,现多从后颈部采取发样。 (3) 样品的预处理 测定生物样品中的元素,一般均需首先破坏样品中的有机物质。选用何种方法,在某种程度上取决于分析元素和被测样品及基体性质。目前主要有以下几种破坏有机物的方法用于原子吸收分析。 1) 高温干灰化法 为破坏样品中有机物基体,常将样品在450~500℃ 进行干灰化,灰化温度若高