第八章杂环类药物分析(2).pptVIP

（二）离子对高效液相色谱法 基本原理：在流动相中加入与呈解离状态的待测组分离子电荷相反的离子对试剂，形成离子对化合物，使待测组分在非极性固定相中的分配与溶解度增大，来改善色谱保留行为的色谱方法。 碱性物质：烷基磺酸盐阴离子对试剂，如SDS 酸性物质：季铵盐阳离子对试剂，如四丁基溴化铵 色谱柱：ODS-C18，（甲醇/水，乙腈/水）＋离子对试剂 返 回 影响离子对形成的条件： 1、反离子的性质与浓度 2、流动相的组成、pH值及离子强度 1、盐酸异丙嗪注射液的HPLC测定法－USP 色谱条件：苯基硅烷键合相，0.2％戊烷磺酸钠－乙腈－乙酸，流速1.5 ml/min，检测波长：254 nm。 系统适用性：配制吩噻嗪和氯丙嗪的混合溶液进行色谱分析，吩噻嗪的tR为异丙嗪的1.6倍，分离度≥3.0，RSD≤2.0%(n＝5） 测定：外标法定量 Standard Sample Blank 2、硫酸阿托品注射液的含量测定－BP 色谱条件：ODS-C18，流动相：甲醇－水（60：40），含有0.01 mol/l的醋酸钠和0.005 mol/l的磺基丁二酸钠二辛酯（pH=5.5),流速2.5 ml/min，检测波长：257 nm 色谱系统适用性：阿托品和氢溴酸后阿托品R≥2.5 测定：外标法定量 七、液相色谱－质谱联用 LC-MS 选用LC-MS为生物样本体内分析的原因： 1、生物样本含量低，普通检测手段难以满足定量要求 2、生物基质复杂，干扰多 3、生物样品分析要求提供简便、快速的分析方法 4、充分结合液相色谱的分离功能和质谱的检测功能 High-performance liquid chromatography-Mass spectrometry HPLC/MS 单级质谱 HPLC-tandem Mass spectrometry HPLC-MS/MS 多级质谱 LC-MS测定血浆中硝苯地平的浓度 血浆样品的前处理 色谱分析条件 质谱检测条件 分析方法学的建立 样品测定与数据处理 血浆加内标→蛋白沉淀法（PP) 色谱：C18 (150×4.6 mm, i.d., 5μm），柱温30℃，甲醇－水（70：30），流速1.2 ml/min。 质谱条件：APCI、扫描方式，高纯氮气为载气，雾化气压力、流速、干燥气温度、毛细管电压，检测模式：SIM 人血浆中硝苯地平和代谢产物脱氢硝苯地平的研究 血浆样品处理：SPE LC-MS/MS条件：RP-C18(125×4 mm, 4μm） 流动相组成、流速、柱温、质谱电离方式、雾化气压力和流速、CID电压，检测模式、扫描方式 分析方法学： 练习与思考 [A型题] 1. 异烟肼《中国药典》的鉴别方法是 A.三氯化铁反应 B. 水解反应 C.沉淀反应 D.重氮化-偶合反应 E. 与硝酸银试液反应 2. 异烟肼《中国药典》规定的含量测定方法为 A.非水溶液滴定法 B.溴酸钾法 C.碘量法 D.紫外分光法 E.亚硝酸钠滴定法 [B型题] A。与硝酸银试液反应 B.亚硝酸钠-硫酸反应 C. 戊烯二醛反应 D. 水解后重氮化-偶合反应 E. 重氮化-偶合反应 1. 异烟肼 2. 苯巴比妥 3. 尼可刹米 4. 氯氮卓 A B C D A。溴酸钾法 B. 紫外分光光度法 C. 非水滴定法 D. HPLC法 E. 双相滴定法5. 异烟肼6. 尼可沙米注射剂7. 苯甲酸钠8. 地西泮注射剂 A B E D [X型题] 1. 《中国药典》规定用紫外分光光度法测定的药物有 A。苯巴比妥 B. 盐酸氯丙嗪片 C. 地西泮片 D. 盐酸氯丙嗪注射剂 E. 氯氮卓片 2. 可用非水溶液滴定法测定含量的药物有 A。尼可刹米 B. 盐酸氯丙嗪 C. 奋乃静 D. 地西泮 E. 氯氮卓 返 回 简答题： 1、简述酸性染料比色法的基本原理及实验条件优化？ 2、简述双波长分光光度法测的盐酸氯丙嗪含量的原理？ 3、简述非水碱量法中无机酸盐的排除方法？ 4、简述杂环类药物常用的含量测定方法？ (四) 应用实例 1.游离弱碱性药物测定 异烟肼、尼可刹米、地西泮及氯氮卓等。基于这些药物分子结 构中氮原子的弱碱性，可用非水溶液滴定法直接测定其含量。由于 这些药物的碱性强弱不同，测定时所采用溶剂、指示剂及其指示终 点的方法也不尽相同。 药物名称 取样量(g) 溶