溶血标本血钾的测定.docxVIP

++[1-5] + + [1-5] 利用溶血程度指数法校正溶血标本血清钾离子测定研究 钱高潮  黄旭东 丁志祥  金文涛  张琪 摘要  目的  常州市中医医院检验科 常州 213003 对于一些不宜重新抽取血液的溶血标本，通过全自动 生化分析仪中血清信息功能溶血程度 H 与血钾的相关性，探索一种 简单方便的校正公式检测溶血标本中血钾浓度，供临床参考。方法 分析溶血程度 H 与血钾的相关性并建立回归方程，研究不同人群中 H=50 时血钾浓度是否存在差异并通过外加溶血标准液和制备溶血标 本两种方法进行验证。结果 H 与[K ]成正相关（r=0.9996），回归方 程 y=0.1068H+0.2789,当 H 在 1~200（Hb 约为 95g/L）之间成线性； 经单因素方差检验，新生儿、成年男性和成年女性之间差异无统计 学意义；两种方法验证均表明计算得到的 K 与实际检测值之间差异 无统计学意义，理论值平均相对误差 3.0%，最大相对误差 7.0%。 结论  通过全自动生化分析仪中血清信息功能溶血程度 H 和公式 K 未=K 溶-0.1068H-0.2789  能比较准确的测算出溶血标本中真实血钾浓 度，这个公式不受患者年龄、性别的影响。 关键词  溶血； 溶血程度 H；血钾 鉴于人红细胞脆性较大,多种原因可使标本发生不同程度的溶血,直 接影响测定结果的准确性 。溶血会对许多检验结果产生影响，尤 其在血钾检测中影响非常明显，因为人体体液中98%的钾分布于细胞 内液，细胞外液只占2%，钾在组织细胞内的平均浓度为150mmol/L， [6-8][9] [6-8] [9] 红细胞内钾浓度为105mmol/L，血清中钾浓度仅为3.5～5.5mmol/L， 红细胞内钾浓度约为血清钾浓度的20倍，溶血后红细胞中的钾会释 放到血清中，引起血钾浓度的升高,因此标本溶血是血钾误差的主要 原因之一 。溶血标本为一类不合格标本，对于因采集、运输、保 存不当等原因造成溶血必须查找原因，避免或降少溶血的发生，而 对于容易溶血的标本（如儿科标本）、有红细胞结构异常的标本，血 钾的检验结果很难保证。解决该问题的关键在于检验与临床的密切 沟通。但有时临床有不方便立即复查的情况，以及其他因素不宜重 新抽取血液标本时，如果能探索出一个根据标本异常情况程度对检 验结果进行校正的方法，给临床一个比较准确的报告，对临床将非 常有意义。溶血后标本血钾的增高主要是由于红细胞被破坏而造成 红细胞内的血钾释放所致。血清中血红蛋白的含量能直接反映出标 本的溶血程度。如能通过检测血清中血红蛋白的含量，计算出因溶 血造成血钾增高的部分，检测的血钾减去因溶血增高的血钾就能消 除溶血对血钾的影响。现在配有血清信息功能的生化分析仪(如日立、 罗氏、岛津系列生化分析仪)均可通过血清信息中溶血程度 （Hemolytic 简写：H）指数法直接测定Hb, 试剂单一稳定, 自动简 便 。鉴于上述思路，我们对溶血标本血钾的测定进行了研究，以 期找到一种比较方便的检测方法。 材料与方法 1.1  标本来源 江苏省常州市中医医院 2010 年 6 月至 2010 年 12 月 住院新生儿 40 例(1～20 天)、成年男性 40 例（20～68 岁）、成年女 性 40 例（21～73 岁）。 1.2  试剂与主要仪器：自配 Tris-HCl 缓冲液（pH7.4）； 6.0mmol/LKCl 标准液；胆红素标准液（上海生物制品研究所提供）； 日立 7600 全自动生化分析仪；-70℃冰箱（SANYO） 1.3  溶血程度H及血钾的测定  按日立7600全自动生化分析仪操作 说明书要求设定血清信息使用项目样品吸量为10μl, Tris-HCl缓冲液 吸量为190μl, 采用速率法, 反应时间10分钟。设定血清信息参数 C=1,B=121000；血钾的测定选用离子选择电极间接法。 1.4  溶血程度H与血钾相关性  取抗凝血，离心去除血浆，用生理 盐水洗涤红细胞3次，以压积红细胞的容积为准，加入等体积的生理 盐水，-70℃冻存1小时，立即放入37℃水箱5分钟，反复冻溶2次， 3000转离心5分钟，分离出Hb溶液，并用生理盐水调节至H=200的标 准液, 然后用生理盐水稀释成H为 150，100，75，50，45，40，35，30，25，20，15，10，8，6，5， 4，3，2，1共20种浓度Hb溶液,检测血钾浓度（当H＜20时，用 6.0mmol/L KCL标准液替代生理盐水进行稀释，血钾浓度通过计算得 到）。 1.5  不同人群红细胞溶血H=50时血钾的测定  选取我院2010年6月 至2010年12月住院新生儿40例、成年男性40例、成年女性40例标本， 制备Hb方法同上