【凝胶色谱法的原理和方法】血红蛋白的提取和分离.docxVIP

2009 年江苏省洪泽中学高三生物第一轮复习教学案---------------------------------------------------- 高三生物备课组 【课 题】：　课题 6 血红蛋白的提取和分离 【备 课 人】： 【备课时间】： 【上课时间】： 【课 型】：复习 【课 时 数】：1 课时 【复习目标】 本课题通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，使学生能够体验从复杂体系中提取生 物大分子的基本过程和方法，并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理，为今后学 习运用这些技术打下基础。 【复习重点与难点】 复习重点：凝胶色谱法的原理和方法。 复习难点：样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。 【知识回顾】： 一、实验原理 蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差 万别，由此提取和分离各种蛋白质。 1．凝胶色谱法（分配色谱法）： 原理：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分 子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。 凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。 （3）分离过程： 混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子 ＊ 洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。 （4）作用： 分离蛋白质，测定生物大分子分子量，蛋白质的脱盐等。