乳与乳制品非常规理化指标检验维生素AE的检测.pdfVIP

乳与乳制品非常规理化指标检验维生素 AE 的检测 YLNB 5.10 1. 范围 用液相色谱法测定各种婴幼儿配方食品和乳粉中的维生 素A、E。 2. 方法提要 样品中脂溶性维生素在皂化过程中与脂肪分离，经（用） 乙醚萃取后，用高压液相色谱，紫外检测器定量测定。 3. 试剂 所有试剂，如未注明规格，均指分析纯；所有实验用水， 如未注明其他要求，均指三级水。 3 ．1 乙醚：脱醛 3 ．2 甲醇：色谱纯 3 ．3 异丙醇：色谱纯 3 ．4 无水乙醇：色谱纯 3 ．5 无水乙醇：分析纯 3 ．6 氢氧化钾溶液：质量体积比为 500g/L 3 ．7 抗坏血酸： 100g/L 3 ．8 无水硫酸钠：分析纯 3 ．9 维生素 A、E标准溶液 3 ．9 ．1 维生素 A标准贮备液，取适量维生素 A醋酸酯同 5.2 处理。 3 ．9 ．2 维生素 E标准贮备液，含维生素 E400μg/mL 的乙醇 （3.4 ）溶液。 称取 40mg的 α- 生育酚，用乙醇（ 3.4 ）溶解并定容于 100mL 容量瓶中。 称取 40mg的 δ- 生育酚，用乙醇（ 3.4 ）溶解并定容于 100mL 容量瓶中。 称取 40mg的 γ- 生育酚，用乙醇（ 3.4 ）溶解并定容于 100mL 容量瓶中。 3 ．9 ．3 维生素 A、E标准工作液。 量取 1mL维生素 A标准贮备液（ 3.9.1 ）和 2.5mL维生素 E 标准贮备液（ 3.9.2 ）于 100mL容量瓶中，用乙醇（ 3.4 ）溶 解， 0.45 μm滤膜过滤，滤液作为标准工作溶液。 按照下表中的波长在紫外分光光度计上测定吸收值，并 按公式（ 1）和表中系数计算浓度。 标样 波长（ nm） 系数 (S) 维生素 A (IU/ml) 325 3.33/1835 α- 生育酚 ( μ 294 71 g/ml) δ- 生育酚 ( μ 298 91.2 g/ml) γ- 生育酚 ( μ 298 92.8 g/ml) C(IU/ml 或 μg/ml)= A 10000 ………………………公式 （1） S 式中： C—标样浓度， IU/ml 或 μg/ml A —在紫外分光光度计上测得的吸光值 S—系数 4. 仪器及器材 常用实验室仪器及： 4 ．1 圆底烧瓶： 250mL。 4 ．2 分液漏斗： 500mL。 4 ．3 旋转蒸发仪。 4. 4 摇床水浴锅。 4 ．5 高压液相色谱仪：具有可变波长的紫外检测器、数据 处理系统或记录仪。 4. 6 紫外分光光度计。 5. 方法 5 ．1 样品处理 精确称取 5.0000g 样品（液态奶 20ml ），置于 250m