兽医流行病学 刘文博 第十一章 血清流行病学精品文档.ppt

第十一章 血清流行病学 用血清学（免疫学）的方法进行流行病 学调查分析，以阐明疾病在群体中的分 布和原因，检验疾病防制措施的效果。 血清可测量物质及疾病相关指标： 矿物质、微量元素、酶和激素、 特异抗体 第一节 概 述 二、用途 1 、阐明疾病的分布规律 特异抗体可以提供畜群是否暴露于传染病 病原体的证据。 以隐性感染为主的疾病，除了进行发病分 布研究外，同时检测相应抗体或抗原进行 分析研究。 2 、寻找与病因相关的因素 ? 追溯诊断：收集发病早期和康复期双份 血清，抗体效价升高 4 倍以上。 ? 在肝癌病人血清中 HBsAg 和抗 HBe 的检 出率明显高于对照组。 ? 血脂、胆固醇与冠心病的关系。 ? 高水平免疫球蛋白与慢性病的关系。 3 、评价防制措施的效果 评价生物制品接种效果。 4 、疾病监测和疫情预报 了解动物群体对某病易感和免疫水平的动态变 化。群体中易感动物比例越大，流行强度越大。 三、方法 （一）调查方法 1 、短期调查 确定是否存在疾病。 2 、长期调查 监测抗体水平和疾病流行的动态变化。 （二）检测方法 凝集试验 (HA) 、血球凝集抑制试验 (HI) 、 葡萄球菌 A 蛋白 (SPA) 协同凝集试验、间接 血球凝集试验 (IHA) 、琼脂扩散沉淀试验 (AGP) 、补体结合试验 (CF) 、免疫荧光试 验 (IF) 、酶联免疫吸附试验 (ELISA) 、放射 免疫试验 (RIA) （三）分析方法 ? 筛检（ screening ）试验： ? 快速简便、早期发现可能有病动物。 ? 筛检出的可疑或阳性病畜均需进一步确诊。 第二节 血清抗体的测定 一、抗体量的表示法 滴度 —产生试验反应的血清最高稀释度 （阳性、阴性、阳转） ? 滴度的对数转换（适合于正态分布检验） 对数平均滴度 几何平均滴度 二、抗体测定 ? 单系列稀释测定 每一稀释度测一次 ， 抗体滴度是区间滴度 ? 多系列稀释测定 每个稀释度测定几次 ， 50% 终点测定 抗体滴度： 50% 试验组成员产生特定后果的血清 稀释度， 用半数有效量 (ED50) 表示 血清稀释度 Log 10 稀 释度 细胞病变 单层数 完整单层数 阳性比例 （ P) 1-P 1/1 0.0 0 5 1.00 0.00 1/2 -0.3 0 5 1.00 0.00 1/4 -0.6 0 5 1.00 0.00 1/8 -0.9 1 4 0.80 0.20 1/16 -1.2 1 4 0.80 0.20 1/32 -1.5 3 2 0.40 0.60 1/64 -1.8 4 1 0.20 0.80 1/128 -2.1 5 0 0.00 1.00 血清抗体 50% 终点测定 Spearman- K?rber法 log 10 ED 50 =L - d (Σp - 0.5) L= 显示全部阳性结果的最高稀释度对数 d= 稀释系数的对数 ∑ p= 从显示全部阳性结果的最高稀释度开始的各稀释度试 验阳性比例总和 L= - 0.6 d=log 10 2=0.3 Σp= 1.00+0.80+0.80+0.40+0.20 =3.20 ED 50 =1/25.1 即 0.1ml 血清含有 25.1 个 ED 50 ，则 1ml 血清含有 251 个 ED 50 。 ? 标准误（ e.s.e ） e.s.e (log 10 ED 50 )= n 为每一组中的试验重复数。 log10 e.s.e =0.3 =0.13 ? 因此，滴度可以表示为每 0.1ml 含 10 1.4 ± 0.13 ED50 ， 或每毫升含 10 2.4 ± 0.13 ED50 。 ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1 / 1 n p p d