第三章液相色谱 质谱联用技术.ppt

目标化合物分析 ? （ 1 ）选择离子监测（ SIM ） SIM 用于检测已知或目标化合物，比全扫描 方式能得到更高的灵敏度。这种数据采集 的方式一般用在定量目标化合物之前，而 且往往需要已知化合物的性质。 若几种目标化合物用同样的数据采集方式监 测，那么可以同时测定几种离子。 （ 2 ）母离子扫描 ? 母离子分析可用来鉴定和确认类型已知的化 合物，尽管它们的母离子的质量可以不同， 但在分裂过程中会生成共同的子离子，这种 扫描功能在药物代谢研究中十分重要。 (3) 中性丢失扫描 中性丢失扫描分析可用来鉴定和确认类型 已知的化合物，例如新生儿遗传疾病筛查 中某些检测项目。也可以帮助进行未知物 结构判断，例如有中性丢失 18Da 的意味着 - H 2 O ， 28-CO ， 30-HCOH ， 32-CH 3 OH ， 44-CO 2 等等。 三、 LC-MS 的应用 ? 医药学：药物代谢、药物动力学、杂质分析、天然产物分析 ? 生物化学：肽、蛋白质、寡核苷酸、糖 ? 环境化学：农药和农残分析、有机污染物、土壤 / 食品 / 水分析 ? 临床医学：新生儿检查、糖化血红蛋白（糖尿病）、血红蛋 白变异、胆酸 ? 食品科学：香料、添加物、包装物、蛋白质、致癌物 ? 法医学：滥用药物、爆炸物、兴奋剂检测 ? 兽医学：兴奋剂、磺胺类药物、抗体 ? 合成化学：有机金属化合物、有机合成物 ? 有机化学：表面活性剂、染料 LC-MS 应用 ? 小分子化合物分析 Mesocarb ( 双苯斯酮胺 ) O N N H N NH O O N N H N NH O N C O OH O N N OH H 3 C H 槟榔有效成分的分析 ? 槟榔含有多种人体所需的营养元素和有益 物质，同时也含有多种药理活性成分，主 要包括生物碱、酚类化合物、脂肪油以及 多种氨基酸和各种各样的矿物质等。槟榔 的主要作用是由槟榔碱的功效体现的。槟 榔碱 (Arecoline) 属于生物碱，是一种含氮杂 环的有机物，分子式 C 8 H 13 O 2 N ，沸点 209 ℃， 溶于醇、醚、氯仿和苯等有机溶剂，不溶 于水。 ? 1 ．根据“氮规律”质量数奇数可以得到该化合物含有奇数个 N 原子。 ? 2 ．结合计算机检索系统，根据同位素丰度，对于荷质比 155 的分子离子峰可以得到一个环加两个双键的数值。 ? 3 ．由于是正离子电离方式，中性离子丢失不多，且分子离子 在首先消去一个中性分子甲基后得到最稳定的 140 质量数的最 高峰。同时根据 Beynon 表及其最小碎片质量数 42 的所有可能 性可以得到该化合物只能含有不超过两个 N 原子。（ 1 个） ? 4 ．对于含有双键和杂环的化合物，它们的分子离子比较稳定， 这从谱图和检索系统的碎片质量数上可以得到它们的一些稳 定的碎片峰。 生物大分子分析 多电荷离子 指带有 2 个或更多电荷的离子，常见于蛋白质 或多肽等离子。有机质谱中，单电荷离子是 绝大多数，只有那些不容易碎裂的基团或分 子结构 - 如共轭体系结构 - 才会形成多电荷离 子。它的存在说明样品是较稳定的。采用电 喷雾的离子化技术，可产生带很多电荷的离 子，最后经计算机自动换算成单质 / 荷比离 子。 ESI 在大气压和环境温度下进行，被分析物的分子在电离过程中通常 产生多重质子化的离子。下图是典型的 ESI 质谱图，由一簇不同程度 质子化的分子离子峰 组成，相邻两峰相差一个质子。对于任意相邻两 峰，由下列公式计算所含的质子数 (n) 和样品的分子量 (M) 。 值 m/z 应 的 是所 选 所 选择 的 两个 峰 x , x 1 n 1 n M x n n M x 2 1 2 1 ? ? ? ? ? ? 13 ＋ 14+ 川牛膝 HPLC — MS 分析 t R =17.67min 的色谱峰，一级质谱数据 (ESI ， MS 其为含量最大的峰，结合杯苋甾酮 ( 分 子量为 520.3) 是川牛膝的主要成分，推测该离子峰为杯苋甾酮分子加合一个甲酸根后 形成的准分离子峰 [M+HCOO] - 。又其二级碎片图中有 m/z=519.2 ，其应为杯苋甾酮分 子失去一个质子形成的碎片离子峰 [ M-H] - 。有 m/z=501.4 ，这应是由于甾酮类物质中 含有较多的羟基，其施加碰撞能后以水分子的形式失去而形成碎片离子峰 [M-H- H 2 O] - 。再结合其它的碎片离子与杯苋甾酮的结构相符，因此推断该化合物为杯苋甾