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核酸化学 DNA与RNA的区别 分布不同:DNA位于细胞核、RNA位于细胞质 含有碱基不同:DNA特有碱基是胸腺嘧啶、RNA特有碱基是尿嘧啶 五碳糖不同:DNA是脱氧核糖、RNA是核糖 结构不同:DNA是双螺旋结构、RNA是单链结构 功能不同:DNA是传递遗传物质、RNA翻译蛋白质 DNA的一、二、三级结构 DNA的一级结构是核酸分子的核苷酸序列 DNA的二级结构是核酸中规则稳定的局部空间结构 DNA的三级结构是DNA双螺旋的基础上进一步扭曲盘绕形成的高级结构 核酸分子的组成以及其化学键 B-DNA的结构(考频) ①两股DNA链反向互补形成双链结构脱氧核糖与磷酸交替连接构成主链,位于外面、碱基侧链位于内部、 ②DNA双链进一步形成右手双螺旋结构:双螺旋直径为2nm、每一螺旋含10bp(10个碱基对)、螺距为3.4nm相邻碱基对之间的轴向距离为0.34nm、双螺旋表面有两条沟槽 ③氢键和碱基堆积力维系DNA双螺旋结构的稳定性:碱基对氢键维系双链结构的横向稳定、碱基对平面之间的碱基堆积力维系双螺旋结构的纵向稳定性。 mRNA、tRNA在蛋白质合成中的作用 mRNA:是在蛋白质合成过程中负责传递遗传信息直接指导蛋白质合成的RNA tRNA:是在蛋白质合成过程中负责转运氨基酸解读mRNA遗传密码的RNA 什么是核酸的变性,变性后理化性质有何改变 在一定条件下(如加热)断开双链核酸碱基对氢键,可以使其局部解离,甚至解离成单链,形成无规线团。 其理化性质有:黏度下降、沉降速度加快、紫外吸收增强 Tm的定义、其大小与什么有关 使双链DNA解链度达到50%所需的温度成为Tm 其大小与DNA分子大小(与DNA的G—C含量成正比)、碱基组成、溶液PH值和离子强度,变性剂有关。 什么是复性、杂交、退火 如果两股单链核酸的序列部分互补甚至完全互补,则在一定条件下可以自发结合,形成双链结构,成为退火;同一来源变性核酸的退火成为复性;不同来源的单链核酸的退火成为杂交。 核算定量的方法 ①定磷法(核算含磷量比较均一) ②定糖法 ③紫外线吸收法 酶 什么是酶及其化学本质 酶是由活细胞生成其催化作用的蛋白质;有些酶属于RNA;其化学本质是蛋白质 什么是酶的活性中心及其与必需基因的关系 酶的活性中心又称活性部分,是酶的分子结构中可以结合底物并催化其反应生成产物的部位 酶的分子结构中存在各种基团并且对酶活性的贡献大小不同。其中一些基团与酶活性密切相关称为酶的必需基团。酶的必需基团可分为两类:一类是维持酶活性构象或参与活性调节;另一类直接参与催化反应,位于酶分子的特定部位,该部位成为活性中心。 辅助因子的作用与分类决定酶促反应种类与性质 分类:小分子有机化合物(参与酶的催化过程,在反应中传递电子质子或一些基团)、无机离子(参与催化反应传递电子、在酶与底物之间起桥梁作用、稳定酶的构象、中和阴离子,降低反应中的静电斥力等) 什么是酶促反应动力学及其讨论前提 酶促反应动力学是研究酶促反应速度及其影响因素的科学 前提:,酶促反应速度、初速度、控制其他因素不变 酶促反映的共性与个性 共性:只催化热力学上允许的化学反应 可以改变化学反应速度,但不改变化学平衡 在化学反应前后没有质和量的改变,并且极少量就可以有效地催化反应 个性:高效性、特异性(绝对特异性、相对特异性、立体特异性)、不稳定性、可调节性 酶浓度、底物浓度对酶促反应速度的影响 酶浓度:在酶促反应中,如果底物浓度远高于酶浓度,并且使酶饱和,则酶促反应速度与酶浓度成正比 酶促反应:①在底物浓度很低时,随着底物浓度继续升高,二者成正比。 ②在底物浓度很高时,随着底物浓度很高时,即使反应速度还在提高,但提高幅度越来越小,二者不再成正比。 ③在底物浓度很高时,即使底物浓度继续升高,反应速度也基本不会提高,此时所有酶分子与底物结合,接近饱和状态。 米氏方程及其应用(Km、Vmax) V。=Vmax[s]/Km+[s] 见书P86~87 温度与PH值对酶促反应的影响 温度:当反应体系温度低于最适温度时,使酶促反应加快;当反应体系温度高于最适温度时,升高温度导致蛋白质变构,变性失活,酶促反应减慢。 PH值:影响酶和底物的解离状态、影响酶和底物的构象、过酸过碱导致蛋白质的变性失活 酶的抑制剂的分类以及与变性因素的区别 分类:竞争性抑制剂、非竞争性抑制剂、反竞争性抑制剂 区别:抑制剂起到抑制酶活性,但不影响其他生理活动 变性是直接作用与蛋白质,发生不可逆的变性 三种可逆抑制剂的表观Km与Vmax的变化情况(老师出题必考) 竞争性抑制作用动力学特征是表观Km值增大,表观Vmax不变 非竞争性抑制剂的表观Km值不变,表观Vmax值减少 反竞争抑制剂的表观Km值减少,表观Vmax减小 什么是酶的活性单位

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