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第三节 食用菌菌种分离的方法 (一) 组织分离法 (二) 孢子分离法 (一) 组织分离法 使用组织分离复壮菌种,简便易行、效果明显, 很适宜一般种植户。 其操作技术要点是: ⑴ 选择种菇: 在菇床、菌墙中选择出菇早、无杂 菌侵染、株型紧凑、圆整肉厚、色泽美观、七 八成熟的第一潮菇的肥壮菇体作种菇; ⑵ 种菇消毒: 在种菇中部取最大的 3-4 张菇片, 用 70% 的酒精轻擦表面后置于接种箱内消毒; ⑶ 菇肉接种 :将菇片纵向撕开,在每个裂面靠近 菇片边缘处取一米粒大小的菇肉组织接于 PDA 培养基上。每张菇片共撕 10 个裂面,接 10 支试 管,一次分离共接 30 ~ 40 支试管; ⑷将试管置于 15 ~ 30 ℃ 下 培养 ; ⑸培养期间每天都要检查发菌情况,从中 选择 菌 丝浓白粗壮、边缘整齐、长速正常、无绿、黄 及浆糊状等杂菌斑点的,表现最好的分离种 转 接于木屑麸皮培养基 上,于 15 ~ 30 ℃ 下培养; ⑹菌丝发满后,在接种箱内去掉棉塞,用蜡封口, 用黑膜包裹后于 4 ~ 9 ℃ 的冰箱内 保藏 ; ⑺在下一个生产季节与原始保藏种作 对比试验 , 择优作为生产用种。每季都如此筛选,能逐步 提高菌种各方面的性状,使发菌加快,抗逆抗 杂性增强,质量明显提高。 (二) 孢子分离法 同一品种经过四年以上栽培就会表现出一些退 化现象,如出菇迟,长势弱,转潮慢,产量不 高等。 通过有性繁殖所产生的孢子进行母种繁 殖是解决种性退化的一条有效途径。 因子实体 孢子弹射量大,接种操作简易,在栽培专业户 中推广孢子分离提纯复壮技术是可行的。 1.母种孢子分离与接种 (1)采菇 选择菇体形态好,生长势健壮,并能代表该 品种性状接近成熟的平菇子实体,采摘一丛或两 丛作为种菇拿回室内备用。要求所采的子实体菌 盖边缘稍卷或已接近平展。 (2)装置与灭菌 用 0.2 %新洁尔灭清洗干净3个 1000 毫升烧杯 和3个培养皿,烘干水分后将培养皿放入烧杯底 部。切取菌盖长达7~9厘米上层或中层的一朵 子实体,用药棉蘸 75 %酒精轻擦菌盖和菌柄后, 将菌褶朝下放入烧杯中的培养皿中如有插菇钢丝 架更好。此操作完成后在烧杯口沿上盖好用无菌 水润湿的4层沙布,上面再盖一层白纸,用皮筋 扎口,以次类推连同3个同样处理的烧杯一起放 入接种箱。接种箱中另放入 30 ~ 40 支 PDA 试管培 养基,接种铲、镊子酒精灯等工具,用 10 毫升甲 醛加6克高锰酸钾混合后对接种箱进行熏蒸消毒 灭菌。 第三章食用菌菌种的制作 一、母种,也称 一级菌种或试管 种 ? 母种鉴定 : 洁白,健壮,无 虫害,有蘑菇香 味 第一节 食用菌菌种的概述 二、原种,也 称二级菌种 原种鉴定 : 洁白,健壮, 有凝水,不 干燥 三、栽培种, 也称三级菌 种 栽培种鉴定 : 洁白,健壮, 有凝水,不 干燥 , 一般不 超过 25-35 天 第二节 培养基 根据各种食用菌生长时对营养物质的要求,用 人工方法配制而成的营养基质,供菌丝生长发 育,把这种营养物质叫培养基。它如同农作物 需要土壤、肥料,动物需要饲料一样。 目前,人们采用的培养基相当多,种类各不相 同。不论哪种培养基都有共同特点: 一般都含 有水分、碳源、氮源、无机盐以及生长因子等 。 碳源 是构成细胞物质的主要元素,也是食用菌生长发膏 所需能量来源。碳源的主要原料是糖类、淀粉、纤维素 物质。代表物质是葡萄糖、蔗糖、玉米粉、麸皮、米糠、 锯木屑、棉籽壳等。 氮源 是食用菌细胞质和细胞核中蛋白质和核酸的主要元 素,蛋白质和核酸是生命的基本物质。一切生命活动都 离不开这些物质。氮源主要有氨基酸、蛋白胨、尿素、 硫酸铵、含有氮素的物质有玉米、棉籽壳。 培养基中的 无机盐 虽用量不多;但不可缺少,它主要是 酶类的组成成分,调节各种生命代谢活动,如磷酸二氢 钾、硫酸镁。 生长因子 需要量很少,是培养基中的特殊营养物质,它 是维持食用菌正常生长所不可缺少的生长因素。如马铃 薯、 麸皮、米糠等都含有丰富的生长因子,维生素也属 此类。 1. 天然培养基 :它是利用天然的有机物配制而 成的培养基。这种培养基来源广,成本低,很 适合实际生产。特别具备营养丰富、制备方便、 经济实用等优点。但他学成分不能定量,每批 成分也不稳定,因此不宜用来进行精确的科学 实验。 常用的天然培养基,有马铃薯培养基、 麦芽汁培养基、杏汁培养基、苹果培养基、麦 芽培养基、堆肥培养基等。
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