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转基因玉米的应用前景 前言: 随着转基因大豆、马铃薯、油菜等许多转基因作物走进人们的 生活，转基因玉米也进入人们的视野。玉米是重要的食物、饲料和工 业原料，种植面积仅次于小麦和水稻，在世界粮食生产中占有重要 的地位。玉米虫害是一个防不胜防的问题, 由于虫害的原因,全中国乃 至全世界的范围的玉米都在减产 转基因玉米的出现对玉米虫害防 止 问题有了新的希望。本文针对转基因玉米基因的研究，转基因玉 米对虫害的防止以及转基因玉米的生物安全性等 问题进行分析综述 主题 ： 一、转基因玉米基因的研究 杀虫蛋白基因 Cry1Ab/1Ac 的研究 虫害的主要原因是玉米螟,它可以危害玉米的任何部位,致 使玉米减产甚至颗粒无收。玉米螟俗名钻心虫,成虫属鳞翅目螟蛾科 ( Lepidoptera Pyralididae ) ，为世界性的蛀食性大害虫，影响玉米产 量和品质的重要因素，世界每年因虫害造成的损失约占 作物产量 的15％以上（1）。要 解决 这一棘手问题紧靠化学农药的使用不仅不 能满足杀虫的目的，还会给人体和环境带来极大的伤害。而在这种 背景下产生的转基因抗虫玉米则可高效专一控制玉米螟，是防治玉 米螟的新途径（1）。常用的方法是从微生物中分离得到目的基因,然后 通过转基因技术将目的基因（抗虫基因）导入玉米的细胞(即受体细 胞)，再通过筛选得到可以稳定表达形状（即抗虫）的玉米。玉米是最难 转化的作物之一，这是因为玉米不是土壤 杆菌的天然寄主，研究初期 转化困难； 另一方面，由玉米的原生 质体悬浮细胞再生可育的植株也比较困难，所以，包括玉米在内的 禾本科作物的遗传转化工作进展缓慢。直至1993年 Michael 成功地用 基因枪法将 Bt(苏云金芽抱杆菌毒蛋白)基因导入玉米并对转基因玉 米植株在田间进行了抗虫试验 Bt 是苏云金芽胞杆菌( Bacillus thuringiensis) 的简称，是一种革兰氏阳性土壤芽胞杆菌 该细菌产生 的杀虫蛋白能够破坏昆虫肠道内的细胞渗透压，导致昆虫死亡 Bt 的一个突出特征就是在芽胞形成过程中，产生由蛋白质组成的且具 有杀虫活性的伴胞晶体，人们称这种蛋白质为δ-内毒素(δ-endotoxins) 或杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal protein，ICP)，而将编码这种蛋白 的基因统称为 Bt （4） Bt 基因是第一代抗虫基因的典型代表，它所 表达的蛋白统称为 Cry 晶体蛋白，其中 Cry1Ab 和 Cry1Ac 基因对玉 米螟等鳞翅目害虫具有专一性毒性（1） 转基因抗虫玉米 Bt-176就是 具有抗鳞翅目尤其是玉米螟等害虫及耐草铵磷除草剂的特性（2） Bt 杀虫晶体蛋白的杀虫机理 Bt 的一个重要特性就是在芽孢形成过程中能产生一系列对 昆虫具有高度特异性毒杀作用的 ICP。由 Bt 编码的 ICP 本身没有生 物活性，一般称为原毒素(pro-toxin) （4）。原毒素被敏感昆虫摄入后， 在中肠的碱性环境下，被特定的蛋白酶水解成分子量约为40 ～70kD 的蛋白，即形成了具有特异杀虫活性的毒素分子。它可穿过包被的 围食膜(peritrophic membrane)到达中肠上皮柱状细胞，与刷状缘膜 (brush border membrane)上特异的高亲和受体位点进行识别，然后可 逆的结合到受体上。在受体的帮助下毒性分子的部分结构迅速而不 可逆地插入质膜 ICP 含有多个疏水的 α 螺旋和亲水亲脂的 α 螺旋组 成的螺旋束，它们一起插入磷脂双分子层中，从而使细胞膜上形成 孔道；这些孔道允许正、负离子以及一些寡糖如麦芽糖、蔗糖或棉子 糖的通过，从而破坏了细胞的离子平衡最终导致细胞的破裂（4）。玉 米螟幼虫食用中 Bt 转基因玉米会出现毒症状：徐艳聆等的实验研究 发现：取食对照玉米的亚洲玉米螟幼虫中肠柱状细胞顶端微绒毛数 量众多排列紧密,质膜完整,内质网发达排列整齐,细胞质均匀，而玉 米螟幼虫取食 Bt 玉米后6 h 中肠细胞未发生明显变化,取