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第八章 病原性球菌检验 临床微生物学检验技术 第一节 葡萄球菌属（Staphylococcus） 临床微生物学检验技术 一、分类 根据色素、生化反应等表型分类 金黄色葡萄球菌（S. aureus） 表皮葡萄球菌（S. epidermidis） 头状葡萄球菌（S. capitis）等 根据凝固酶分类 凝固酶阳性葡萄球菌 凝固酶阴性葡萄球菌 其他分类 临床微生物学检验技术 二、临床意义 1.致病物质 侵袭性酶 凝固酶、耐热核酸酶、透明质酸酶、脂酶等 毒素 葡萄球菌溶素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、 毒性休克综合征毒素-1等 临床微生物学检验技术 二、临床意义 2. 所致疾病 侵袭性疾病 皮肤感染：疖、痈等 器官感染：肺炎、中耳炎、骨髓炎等 全身感染：败血症、脓毒血症 毒素性疾病 食物中毒、烫伤样皮肤综合征、毒性休克综合征 临床微生物学检验技术 三、生物学特性 1.形态结构 • 革兰阳性球菌，葡萄串状排列 • 无鞭毛、无芽胞，一般不形成荚膜 革兰染色 临床微生物学检验技术 三、生物学特性 2. 培养特性 • 营养要求不高 • 普通琼脂平板上18～24h ，形成直径2mm左右，圆形凸起、 光滑湿润的菌落，可产生金黄色、白色、柠檬色等脂溶性 色素 金黄色葡萄球菌的透明溶血环（血琼脂平板） 临床微生物学检验技术 三、生物学特性 3.抗原 • 表面抗原：葡萄球菌A蛋白（staphylococcal protein A, SPA） • 协同凝集试验 临床微生物学检验技术 三、生物学特性 4.抵抗力 • 较强，耐干燥、耐盐 • 对碱性染料敏感 • 易产生耐药性：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 MRSA （methicillin-resistant S.aureus） 临床微生物学检验技术 四、微生物学检验 （一）检验程序 临床微生物学检验技术 四、微生物学检验 （二）标本采集 • 根据感染部位采集标本 • 避免病灶周围正常菌群的污染 临床微生物学检验技术 四、微生物学检验 （三）标本直接检查 • 显微镜检查：涂片，革兰染色镜检，根据形态特征可初步报告 • 抗原检测：乳胶凝集试验测定SPA及荚膜抗原 • 核酸检测 临床微生物学检验技术 四、微生物学检验 （四）分离培养与鉴定 • 血标本先接种肉汤增菌培养基 • 脓液、分泌物等标本接种血琼脂平板 • 粪便等污染标本接种选择培养基，如高盐甘露醇琼脂平板 临床微生物学检验技术 四、微生物学检验 金黄色葡萄球菌 – 血琼脂平板：菌落圆形凸起，金黄色或橙色，菌落周 围出现透明溶血环 – 高盐甘露醇琼脂平板：黄色菌落 临床微生物学检验技术 初步鉴定 葡萄球菌属 涂片染色镜检 菌落形态 触酶试验阳性 氧化酶试验阴性 临床微生物学检验技术 鉴定试验 1.凝固酶试验 （1）玻片法 检测结合型凝固酶 （2）试管法 检测游离型凝固酶 • 金黄色葡萄球菌、中间葡萄球菌阳性 临床微生物学检验技术 鉴定试验 2.耐热核酸酶试验 待检菌肉汤培养物沸水浴15分钟，取数滴，滴