人参皂苷Rg1对糖尿病小鼠视网膜细胞凋亡的保护作用研究.pdfVIP

摘要 摘要 糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病常见的微血管并发症之一，也 是糖尿病视力丧失的主要原因。由于糖尿病视网膜病发病初期临床特征不显著，未得到 DR 足够重视，加之发病机制复杂及治疗难度大，如何有效防治 已经成为医药学界共同 关注的重大课题之一。 人参作为我国名贵中药材具有的调节神经功能、抗细胞凋亡、改善缺血再灌注损伤 等药理作用已经被逐渐应用于心血管疾病的防治中。其中，人参皂苷Rg1作为人参和三 七的皂苷类活性成分之一，在抗凋亡、抗氧化和降低血糖等方面具有独特的疗效。此 外，人参皂苷Rg1还可通过抑制心肌细胞凋亡来改善糖尿病心肌病。在以往的文献中很 少评估人参皂苷Rg1对糖尿病视网膜病的影响研究，因此在前期研究的基础上，本课题 旨在探讨人参皂苷Rg1对糖尿病视网膜损伤的保护作用，为研究其确切分子机制及药物 开发提供依据。 2 db/db 本实验利用自发性 型糖尿病模型 小鼠，我们首先检测了小鼠空腹血糖值及 血脂水平变化，结果证实，人参皂苷Rg1能显著降低小鼠血糖水平，降低血清中甘油三 脂水平，提示我们人参皂苷Rg1在改善糖尿病环境下的高血糖及高血脂方面确有效果。 为了探究糖尿病小鼠视网膜的病理性改变，本实验采用ISOCT 眼科超显微成像系统及 荧光素眼底血管造影技术，通过观察模型组小鼠视网膜中是否有渗漏及微血管瘤等视网 膜损伤的发生，以评价人参皂苷Rg1对于视网膜生理结构改变是否具有改善作用。实验 结果表明，人参皂苷Rg1给药后能显著降低糖尿病小鼠的视网膜通透性，维持正常的生 理结构，改善糖尿病视网膜病变。 为进一步观察糖尿病视网膜病变的形态学变化，本实验还利用免疫组化方法及 TUNEL 实验对视网膜不同组织层进行分析，结果发现，与对照组db/m 小鼠相比，模型 组小鼠视网膜中出现了视网膜各层间排列紊乱、视网膜细胞变性和数量减少等形态学的 改变，并在视网膜的神经节细胞层及内核层出现了明显的视网膜变薄现象，提示这两层 存在视网膜细胞凋亡的现象。而经过人参皂苷Rg1治疗后，视网膜的形态学改变及视网 膜损伤现象明显改善。 最后，本实验利用免疫荧光技术及Western Blot 验证凋亡相关蛋白的表达情况，证 实视网膜中存在细胞凋亡现象，尤其是在视网膜的神经节细胞层和内核层，人参皂苷 Rg1能调节凋亡蛋白的表达水平，减少糖尿病小鼠的视网膜细胞凋亡，从而缓解视网膜 损伤。 最终研究表明，人参皂苷Rg1能降低糖尿病小鼠的血糖水平及血脂水平，降低视网 膜通透性，改善糖尿病视网膜病变的早期病理变化及视网膜损伤，人参皂苷Rg1显示出 较强的视网膜保护作用，其药效学基础可能与抑制视网膜神经节细胞层和内核层细胞凋 亡相关。 I 哈尔滨商业大学硕士学位论文 GCL INL Rg1 关键词 糖尿病视网膜病变；视网膜损伤；细胞凋亡； 和 ；人参皂苷 II Abstract Abstract Diabetic retinopathy (DR) is the most important manifestation of diabetic microvascular disease. It is a kind of diabetic retinopathy with specific changes and a high blindness rate. Be