生物化学实验技术;生物化学实验技术;实验一 ;【目的要求】
掌握双缩脲法测定蛋白质浓度的原理。;【实验器材】
中试管3支,1毫升刻度吸管3支,10毫升刻度吸管1支,水浴箱,721型分光光度计;【方法步骤】;各管混匀、放置37℃水浴中保温20分钟。用540nm比色,以空白管调零点,读取各管光密度值。 ;【注意事项】;【思考题】;实 验二;【目的要求】
①了解分光光度法的基本原理;
②能较熟练使用紫外分光光度计。;【实验器材】
1.紫外分光光度计。
2.微量加样器。
3.蛋白标准液(1mg/ml)。 ;【方法步骤???;管号 ;混匀,以第六管调零点,280nm波长处比色。用光径为1cm的石英杯测定各管吸光度,以各管的吸光度值为纵坐标,计算各管内蛋白质的浓度,以蛋白质的浓度为横坐标绘制标准曲线。
3.标本测定:用生理盐水将待测蛋白质样品稀释成大约1mg/ml溶液。取1.0ml样加生理盐水3.0ml混匀,按上述方法测其吸光度。;【结果与分析】;【注意事项】;【思考题】;
(一) 血清γ-球蛋白的分离
与纯化;1.?掌握蛋白质分离纯化的主要方法和原理;2.熟悉盐析和层析的基本操作;3. 掌握离心机的正确使用方法。;【仪器试剂】
试管、刻度吸管、吸耳球、胶头滴管、层析柱、反应板;血清、PBS液、葡聚糖凝胶G-25、纳氏试剂、饱和硫酸铵溶液。; 【实验原理
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