临床病原学检查（完整版）.ppt

一般程序  标本 直接涂片，染色镜检 分离培养 增菌培养 需氧培养 ? 二氧化碳培养 厌氧培养 观察菌落形态 单个菌落 涂片、染色镜检 血清学鉴定 生化鉴定 药敏试验 确定致病菌发出报告 ..... * 2.病原体诊断的基本方法 直接显微镜检测（microscopic examination） ⑴染色标本检查法：革兰染色和抗酸染色 ⑵不染色标本检查法：悬滴法和压滴法 ..... * 2.病原体诊断的基本方法 病原体分离培养(isolation and culture)和鉴定(identification) 培养基选择 生长条件：一般大气条件 厌氧条件 微需氧条件 ..... * 2.病原体诊断的基本方法 鉴定技术： 生化鉴定 血清学鉴定 数码鉴定 自动化鉴定 ..... * 2.病原体诊断的基本方法 血清学诊断：查特异性抗体——肥达氏试验 病原体特异性抗原检测 病原体核酸检测：查特异基因片段DNA/RNA——PCR、DNA探针杂交技术 ..... * 第二节 细菌耐药性检查 ..... * 一.抗微生物药物敏感性试验（AST） 1.定义：对敏感性不能预测的临床分离菌株进行药敏试验，以指导临床选择治疗药物和了解区域或医院内常见病原菌耐药性变迁，有助于临床经验性治疗选药。 ..... * 一.抗微生物药物敏感性试验（AST） 2.常用敏感性试验方法 ⑴手工试验:①K-B纸片琼脂扩散法 结果表示:S-Susceptible I-Intermediate R-Resistant ②稀释法（MIC） ③Etest ④联合药敏试验 ..... * 一.抗微生物药物敏感性试验（AST） ⑵自动化仪器 Vitek，Microscan ⑶分子试验 PCR直接检测mecA基因 ⑷补充试验 Nitrocefin ..... * 一.抗微生物药物敏感性试验（AST） 3.药敏试验结果与临床抗生素剂量关系 敏感(S)——一般剂量有效，推荐使用该抗生素用于临床治疗 中介(I)——大剂量有效，提示药物MIC接近体液或组织可达到药物浓度 耐药(R)——大剂量无效,即常规用药剂量不能达到MIC ..... * 一.抗微生物药物敏感性试验（AST） 4.K-B纸片扩散试验的影响因素 琼脂厚度 与抑菌圈直径成反比 菌液浓度 与抑菌圈直径成反比 药敏试纸 含量–与抑菌圈直径成反比 保存温度–20℃，使用前室温平衡 30min后开启 湿度-密封容器，硅胶防潮 NCCLS标准 培养种类(MH),厚度(4mm) 接种量(0.5MF) 选药标准,判读标准,质控标准 ..... * 质控参考菌 金黄色葡萄球菌 ATCC 25923 大肠埃希菌 ATCC 25922 铜绿假单胞菌 ATCC 26853 ..... * 二.耐药机制及耐药性监测试验 1.耐药菌株： 耐甲氧西林葡萄球菌（MRS） 耐青霉素肺炎链球菌（PRSP） 耐万古霉素肠球菌（VRE） 质粒介导的超广谱?-内酰胺酶（ESBL）