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微生物的生长遗传和变异 微生物的遗传和变异;育种——定向培育; 诱变育种:利用物理、化学等诱变剂处理均匀而分散的微生物细胞群,在促进其突变率显著提高的基础上,采用简便、快速和高效的筛选方法,从中挑选出少数符合要求的突变菌株,以供科学研究或生产实践使用的方法。 ;选择选择合适的出发菌株
↓
制备待处理的菌悬液
↓
诱变处理
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筛选
↓
保藏和扩大试验; 出发菌株———用来育种处理的起始菌株◆ 出发菌株应具备: ①对诱变剂的敏感性高; ②具有特定生产性状的能力或潜力; ◆ 出发菌株的来源; ①自然界直接分离到的野生型菌株: ②历经生产考验的菌株: ③已经历多次育种处理的菌株:; 要求: ① 菌体处于对数生长期,并使细胞处于同步生长; ② 细胞分散且为单细胞,以避免表型迟延现象;
方法: ①玻璃珠打散10-15min; ②加0.3%吐温80(表面活性剂) ③用无菌脱脂棉过滤。
制备: 物理诱变剂——生理盐水(0.85%NaCl) 化学诱变剂——缓冲液
浓度: 细菌、放线菌 108个/ml 霉菌、酵母菌 106个/ml; 诱变剂的作用:
① 提高突变的频率
② 扩大产量变异的幅度
③ 使产量变异朝着正突变或负突变移动
剂量的表示法:不同种类和不同生长阶段的微生物对诱变剂的敏感程度不同,所以在诱变处理前,一般应预先作诱变剂用量对菌体死亡数量的致死曲线,选择合适的处理剂量。—致死率是最好的诱变剂相对剂量的表示方法。
最适剂量的选择:产量性状的育种中多倾向于低剂量(致死率在70~80%); 筛选方案:
实际工作中,为了提高筛选效率,往往将筛选工作分为初筛和复筛两步进行。
初筛的目的:删去明确不符合要求的大部分菌株,把生产性状类似的菌株尽量保留下来,使优良性状的菌株不至于漏网;——因此,初筛工作以量为主,测定的精确性还在其次;初筛手段应尽可能快速、简单。
复筛的???的:确认符合要求的菌株;——复筛以质为主,应精确测定每个菌株的生产指标。;可见,设计和采用效率高的筛选方案和方法极其重要;质粒育种 ;质粒育种 ;基因工程 ;基因工程 ;基因工程
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