抗人球蛋白试验精析.pptVIP

抗人球蛋白试验 马强虎  1945年,英国免疫学家库姆斯( Coombs) 等人发明了能检测红细胞表面抗体的一种新试验 ,即抗人球蛋白试验。别名: Coombs‘试验(库姆 斯试验)。 Coombs试验是利用抗球蛋白抗体作为 第二抗体,连接与红细胞表面抗原结合的特异抗 体,使红细胞凝集。  抗人球法是检测不完全抗体的经典方法 分为直接试验(直接反应)和间接试验(间 接反应) 直接 Coombs试验:是检查被检红细胞上 有无不完全抗体。 间接 Coombs试验:是检查血清中游离的 不完全抗体  直接抗人球蛋白试验 直接抗人球蛋白试验原理 ●患者体内着有与红细胞抗原不 不完全抗 体存在 红细胞结合形成 体复合物 ●但因不完全抗体分子量小,不能有效地连接抗 原抗体复合物,仅使红细胞处于致敏状态。 ◆加入抗球蛋自血漬,与红细胞上吸咐的不完全 抗体结合,在致敏红细胞之间搭桥,出现肉眼 可见的凝集。 ●这种真接检测体内被抗体或(和)补体致敏红 细胞的试验称之为音接抗球白试验。了  直接抗人球蛋白试验 直接抗人球蛋白试验操作:(65%凝胶, 35%抗人球蛋白试剂) 1撕开检测卡的封膜于反应腔中加入待检 1%RBC生理盐水悬液50ul; 2将检测卡于离心机1800r/min1min, 2500/min1min离心 3取出,结果判读  结果判读 3 d- p. Hemo 3 H  致敏RBC 可见凝集 抗人球蛋白 自身抗体 直接C00mbs试验  ◆4结果解释 ◆阳性∶待检标本RBC已致敏gG不完全抗体 或补体; ◆阴性∶待检标本RBC未致敏不完全IgG抗体  间接抗人球蛋白试验 间接抗人球蛋白试验原理 ●用已知抗原的红细胞检测受检者血漬中相应的不 完全抗徠或用已知的不亮筌抗体检测纤细胞 相应的抗原 ●在37°C条件下,若被检血清或红细胞有对应的不 完全抗体或抗原,则抗原抗体作用使红细胞致每 再加抗人球蛋白试剂,与红细胞上不完全抗体结 现肉眼可见凝集。 种通过体外将红细胆致敏兵再检泗红细跑有 验。  间接抗人球蛋白试验 间接抗人球蛋白试验操作:(65%凝胶,35% 抗人球蛋白试剂) 1撕开检测卡的封膜于反应腔中依标记分别加入 相应的0.5%筛选细胞LM悬液100u,各管再 加入待检血浆或血清25ul; 2将检测卡37℃孵育三10min,取出,置离心 机1800/min1mn,2500/min1min离心; 3取出,结果判读;(方法同上)