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基因工程专题习题 一、回复相关基因工程问题。（10分） 下表中列出了多个限制酶识别序列及其切割微点，图一、图二中箭头表示相关限制酶酶切位点。 64．限制酶Sma = 1 \* ROMAN I和限制酶Xma = 1 \* ROMAN I作用相同点是________________________________，不一样点是____________________________________________。 65．研究发觉复制原点碱基序列特点通常含A、T碱基较多，其意义是_______________________。 66．图二中目标基因需要同时使用Mse酶和Pst = 1 \* ROMAN I酶才能获取，而图一所表示质粒无对应限制酶切位点。所以在用该质粒和目标基因构建重组质粒时，需要对质粒改造，构建新限制酶切位点。试写出构建需要限制酶切位点过程（提供构建需要全部条件）： ①首先用_______________酶处理质粒； ②然后用DNA聚合酶处理质粒，使被酶切开质粒末端连接上对应脱氧核糖核苷酸； ③再利用_______________酶处理质粒，从而形成新限制酶切位点，即可被__________酶识别。 基因工程中检测筛选是一个关键步骤。下图表示利用影印培养法（使在一系列培养皿相同位置上能出现相同菌落一个接种培养方法）检测基因表示载体是否导入大肠杆菌。 67．培养基除了含有细菌生长繁殖必需成份外，培养基A和培养基B分别还含有______________、________________。从检测筛选结果分析，含目标基因是__________菌落中细菌。 二、人类是乙型肝炎病毒唯一宿主，现有肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染最有效方法。乙型肝炎疫苗研制前后经历了血源性疫苗和基因工程疫苗阶段。 血源性“乙型肝炎疫苗”是取用乙肝病毒感染者血液，用高速离心提纯血液中乙肝病毒，以后再灭活，制成乙肝疫苗。乙肝病毒结构中 成份是激发免疫反应抗原。 乙肝工程疫苗生产和使用过程以下： 目标基因 目标基因 重组质粒 导入大肠杆菌 乙肝病毒外壳 注射型接种 出现抗体 ① ② ③ ④ ⑤ 56. 从上图可知，该目标基因具体功效是 57. 若要快速获取大量目标基因，以提升重组质粒生产效率，常见技术是（写全称） 。 过程①合成重组质粒需要限制酶，还需要 酶 58. 用基因工程疫苗接种比血源性疫苗更安全，试从疫苗结构特点解释原因： 59. 目标基因在人体细胞和大肠杆菌细胞中均能表示出相同抗原，这是因为 原因所致。 图2 图2 图1 EcoRV BamHI 目标基因 卡那霉素 抗性基因 EcoRI EcoRV 四环素 抗性基因 HindIII EcoRV BamHI BamHI EcoRI HindIII 要成功转入目标基因，有两种选择限制酶方案，它们分别是 或 。其中有一组方案重组效率较高，其原因是 61. 用上述两种方案酶切大肠杆菌质粒和目标基因，再一并加入相关合成酶。一段时间后，最多能够取得 种含完整四环素抗性基因质粒。 62. 写出筛选、获取含有目标基因大肠杆菌培养和判别方法： 。 三、大肠杆菌和人类生产生活亲密相关。据图表回复下列相关问题： 63.科研人员用放射线处理某大肠杆菌取得两个突变株A和B，然后对A和B进行试验，结果如上表。 ①突变株A不能在通常培养基上生长直接原因是______________________________。将突变株A和B混合在一起接种于通常培养基中，却能正常生长最可能原因是______________ ______ ____。 ②依据上表可知，营养物质甲、乙对突变株A、B来说属于_________