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基因工程 9、现有一长度为1000碱基对(bp)DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRⅠ酶切后得到DNA分子仍是1000bp，用KpnⅠ单独酶切得到400bp和600bp两种长度DNA分子，用EcoRⅠ、KpnⅠ同时酶切后得到200bp和600bp两种长度DNA分子。该DNA分子酶切图谱正确是 [???? ] A． B．C． D． 11、下列相关限制性核酸内切酶识别叙述，不正确是 A. 从反应类型来看. 限制性核酸内切酶催化是一个水解反应 B. 限制性核酸内切酶活性会受温度、pH等外界条件影响 C. 一个限制性核酸内切酶只能识别双链DNA中某种特定脱氧核苷酸序列 D. 限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现几率就越 12、基因工程中，需使用特定限制酶切割目标基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制酶II识别序列和切点是—↓GATC—。依据图示判定下列操作正确是（??? ） A．目标基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B．目标基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目标基因用限制酶Ⅰ切割 D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目标基因用限制酶Ⅱ切割 8、因为质粒和目标基因含有相同粘性末端，结合过程中不可能出现下列哪种情况？A形成环状外源DNAB可能形成环状载体DNAC可能重组DNAD只出现重组DNA 9、下列获取目标基因方法中需要模板链是  ①从基因文库中获取目标基因 ②利用PCR技术扩增目标基因 ③反转录法 ④经过DNA合成仪利用化学方法人工合成 A．①②③④ B．①②③ C．②③④ D．②③12、质粒是基因工程中最常见运载体，它存在于很多细菌体内。质粒上有标识基因图1所表示，经过标识基因能够推知外源基因(目标基因)是否转移成功。外源基因插入位置不一样，细菌在培养基上生长情况也不一样，表1是外源基因插入位置(插入点有a、b、c)，请依据表中提供细菌生长情况，推测①②③三种重组细菌外源基因插入点，正确一组是 [???? ] A．①是c；②是b；③是aB．①是a和b；②是a；③是bC．①是a和b；②是b；③是aD．①是c；②是a；③是b 3、下图为某种质粒表示载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ酶切位点，ampR为青霉素抗性基因。tetR为四环素抗性基因，P为开启子，T为终止子，ori为复制原点。已知目标基因两端分别有包含EcoRⅠ、BamHⅠ在内多个酶酶切位点。据图回复： (1)将含有目标基因DNA和质粒表示载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成产物有________、_______、_______三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行___________。(2)用上述3种连接产物和无任何抗药性原核宿主细胞进行转化试验。以后将这些宿主细胞接种到含四环素培养基中，能生长原核宿主细胞所含有连接产物是________；若接种到含青霉素培养基中，能生长原核宿主细胞所含有连接产物有___________。(3)目标基因表示时，RNA聚合酶识别和结合位点是，其合成产物是_____________。(4)在上述试验中，为了预防目标基因和质粒表示载体在酶切后产生末端发生任意连接，酶切时应选择酶是________________。 5、下图表示从苏云金芽孢杆菌分离出杀虫晶体蛋白基因(简称Bt基因)及形成转基因抗虫植物图解。请分析回复： (1)写出b过程表示式__________________________。 (2)人工合成目标基因方法有： ①____________________________________________________； ②_____________________________________________________。 (3)将目标基因和载体(质粒)结合工具酶有_________________________________。 (4)科学家计划从哺乳动物乳汁中提取某种抗体，应将控制抗体合成基因导入该种动物　　　　中，导入基因成功表示标志是　　　　　　　　　　　　　。 (5)培育出抗虫棉是否就能一劳永逸地处理棉花害虫问题了吗？是从一个角度说明上述问题：_____________________________________________________________。 6、组建理想载体需要对天然质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(显示部分基因及部分限制性内切酶作用位点)，据图分析： ①