微生物发酵制药技术 微生物发酵制药技术教学课件 7.发酵染菌的防治 （020700）.pptVIP

项目7 发酵染菌的防治 无菌检查的流程： 噬菌斑（plaque）：由于噬菌体的作用而使布满细菌细胞的菌苔上，出现肉眼可见的一个个透亮的小圆斑。 无菌室要求 打开紫外灯，照半小时，关灯后15分钟再接种。 消毒药水擦桌子、拖地，开启超净台的通风， 接种时必须在超净台上操作，保证无菌条件。 接种人员必须穿好无菌服，戴好口罩，手用酒精棉球擦干净。 项目7 发酵染菌的防治 项目7 发酵染菌的防治 《发酵制药》 项目7 发酵染菌的防治 3、培养基和设备灭菌不彻底导致染菌及防治 （1）实罐灭菌时未充分排除罐内空气：造成假压。 升温时，应打开排气等阀门放气。 培养基灭菌方法——高压蒸汽灭菌 分批灭菌 121℃，30分钟 连续灭菌 罐温125－130℃ ，30－45分钟 项目7 发酵染菌的防治 项目7 发酵染菌的防治 （2）连续灭菌时，蒸汽压力波动大，培养基未达到灭菌温度，导致灭菌不彻底。 （3）设备和管道存在“死角” 死角：由于操作、设备结构、安装或人为造成的屏障等原因，引起蒸汽不能有效到达或不能充分到达预定应该到达的局部灭菌部位，从而不能达到彻底灭菌的要求。 项目7 发酵染菌的防治 常见的设备、管道“死角” 发酵罐的“死角”：不锈钢衬里破裂造成死角，发酵罐罐底脓疱状积垢。 项目7 发酵染菌的防治 罐底的加强板 项目7 发酵染菌的防治 法兰的“死角” 垫圈内圆过小；垫圈内圆过大；法兰不平造成的泄漏与“死角” 项目7 发酵染菌的防治 如何解决下图的问题？ 灭菌时蒸汽不易通达的“死角” 项目7 发酵染菌的防治 项目7 发酵染菌的防治 如何解决下图的死角？ 压力表安装不合理形成“死角” 1—发酵罐；2—缓冲管；3,—压力表； 项目7 发酵染菌的防治 6、发酵罐 5、旋塞 4、压力表 项目7 发酵染菌的防治 项目7 发酵染菌的防治 消灭死角 减少挡板和开孔 焊接光滑 法兰、阀门连接正好 减少残渣沉积 严格清洗和检查 项目7 发酵染菌的防治 项目7 发酵染菌的防治 4、设备渗漏引起的染菌及其防治 发酵设备、管道、阀门长期使用，由于腐蚀、摩擦和振动等原因，造成渗漏。 微小渗漏的检查：加入碱性水，用浸湿酚酞 指示剂的白布擦，有渗漏则白布显红色。 项目7 发酵染菌的防治 定期检修易坏部件 化学腐蚀 电化学腐蚀 磨蚀 设备加工不良 设备渗漏的防治 项目7 发酵染菌的防治 5、噬菌体污染及其防治措施 产生噬菌体的原因：自然界中的噬菌体在活菌体中大量生长。随着风沙尘土和空气流动传播，以及人们的走动、车辆的往来也携带着噬菌体到处传播，使噬菌体潜入生产各个环节，尤其是通过空气系统进入种子室、种子罐、发酵罐。 噬菌体的检测方法 双层琼脂法：在培养皿上倒入培养生产菌的培养基（加琼脂）作下层。同样的培养基中加入20％～30％培养好的种子液，再加入怀疑染噬菌体的发酵液，摇均匀后，铺上层。培养过夜观察培养皿上是否出现噬菌斑。 项目7 发酵染菌的防治 项目7 发酵染菌的防治 * 《微生物发酵制药技术》 淄博职业学院 知识目标 了解染菌对发酵的影响。 理解发酵染菌的原因。 知道发酵过程染菌的防治措施。 能力目标 利用所学知识，能对发酵染菌原因进行分析，并提出解决方案。 项目7 发酵染菌的防治 项目7 发酵染菌的防治 什么是染菌？ 项目7 发酵染菌的防治 染菌：发酵过程中污染杂菌的现象。 杂菌：在发酵过程中侵入了有碍生产的其他微生物。 几乎所有的发酵工业，都有可能遭受杂菌的污染。染菌的结果，轻者影响产量或产品质量，重者可能导致倒罐，甚至停产。因此，防止杂菌污染是任何发酵工厂的一项重要工作内容。 项目7 发酵过程控制 任务1 工业发酵染菌的危害 据报道,国外抗生素发酵染菌率为2％~5%，国内抗生素发酵、青霉素发酵的染菌率为2％，链霉素、红霉素和四环素发酵染菌率为5%，谷氨酸噬菌体感染率为1％～2％。 项目7 发酵染菌的防治 一、 染菌对各种发酵的影响 青霉素：产青霉素酶的杂菌,青霉素被分解,无法积累产物。 疫苗：全部废弃 《发酵制药》 项目7 发酵过程控制 二、染菌种类对发酵的影响 青霉素发酵：细短杆菌比粗大杆菌危害大 链霉素发酵：细短杆菌和假单孢杆菌和产气杆菌比粗大杆菌危害大 四环素发酵：污染双球菌、芽孢杆菌和夹膜杆菌危害大 核苷酸：对芽孢杆菌敏感 项目7 发酵染菌的防治 三、不同染菌时期对发酵的影响 （1）种子培养期：易染菌 （2）发酵前期：易染菌 （3）发酵中期：对生产影响大，挽救处理困难，危害性大 （4）发酵