新人教版高中生物选修1DNA和蛋白质技术.docxVIP

???????????????????????名校名 推荐??????????????????? DNA和蛋白质技术 课时安排： 1 课时 课题目标： 1．通过尝试对植物或动物组织中的 DNA进行粗提取，了解 DNA的物理化学性质，理解DNA粗提取以及 DNA鉴定的原理。 2．通过尝试 PCR（DNA多聚酶链式反应）技术的基本操作，使学生体验 PCR这一常规的分子生物学实验方法，理解 PCR的原理，讨论 PCR的应用。 3．通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离， 使学生能够体验从复杂体系中提取生物大 分子的基本过程和方法，并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理，为今后学习 运用这些技术打下基础。 课题重点： 1．DNA的粗提取和鉴定方法。 2．PCR的原理和 PCR的基本操作。 3．凝胶色谱法的原理和方法。 课题难点： 1．的粗提取和鉴定方法。 2．PCR的原理。 3．样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。 考点点拨： 一、相关知识 （一）基本概念 DNA的粗提取、二苯胺；多聚酶链式反应、 PCR、解旋酶、 DNA聚合酶；血红蛋白、凝胶色谱法、分配色谱法、缓冲溶液、电泳 （二）知识网络 提取的基本思路：选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。 DNA 的物理性质：溶解性 基础知识 对酶、高温和洗涤剂的耐受性 DNA 的鉴定：在沸水浴的条件下， DNA 与二苯胺被染成蓝色 DNA的粗提取与鉴定  实验材料的选取：原则——凡是含有 DNA 的生物材料 都可以考虑，但是含量相 对较高的生物组织成功的 可能性更大 实验设计 破碎细胞获取含 DNA 的滤液 取出滤液中的杂质 DNA 的析出与鉴定 操作提示 结果分析与评价 课题延伸 基础知识 PCR 原理：该反应需要在一定的缓冲溶液中提供： DNA 模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，耐热的 DNA 聚合酶，同时通过控制温度使 DNA 复制 ???????????????????????名校名 推荐??????????????????? 多聚么链式反应 扩增 DNA片段 基础知识 血红蛋白的 提取和分离 实验设计操作提示 结果分析与评 价 课题延伸  凝胶色谱法：也称分配色谱法，是根据相对分子质量 的大小分离蛋白质的有效方法。 缓冲溶液：在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的 酸和碱对溶液 PH 的影响，维持 PH 值得基本不变 电泳：带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。 （三）疑难解析 生物大分子 1）认识生物大分子的模样 生物大分子的立体结构是它们发挥各种各样生物功能的基础。只有认识了生物大分子的 结构，才能解析生物功能，并以此为依据来设计治病的药物。 在维特里希发明新方法以前的几年间， X 射线晶体学是解析生物大分子的空间结构的惟一有效的方法。 20 世纪 80 年代，维特里希改进了传统的核磁共振技术，使得它能测定溶液中生物大分子的空间结构。 该方法的基本原理是，原子核在强磁场的作用下会产生能级裂分，并在微波照射下产生共振。由于分子中各个原子核的周围环境不同，所产生的共振频率不一样，从而能被区分开来。维特里希通过核磁共振仪首先测定生物大分子中空间相邻两个原子核间的距离和方位，然后通过计算机处理，将所有测得的距离和方位转换成原子坐标，计算机就根据这些指标画出一张生物大分子的立体图像，我们就能“看清”生物大分子的模样了。所有已知蛋白质的结构有 15%—20%是用这一方法测定的。 2）生物大分子的一般提取方法①以分子大小和形态的差异为依据的方法：差速离心、区带离心、超滤、透析和凝胶过 滤等 ②以溶解度的差异为依据的方法：盐析、萃取、分配层次、选择性沉淀和结晶等③以电荷差异为依据的方法：电泳、电渗析、等电荷沉淀、吸附层析和离子交换层析等。④以生物学功能专一性为依据的方法：亲和层析等 血红蛋白 血红蛋白分子是由珠蛋白、 原卟啉和二价铁离子 (Fe 2+) 所组成的结合蛋白质。 有 4 条肽链各结合一个辅基即血红素， O2 即结合于 Fe2+上，血红蛋白与氧疏松结合形成氧合血红蛋白 (HbO2 ) ，这种氧合作用在氧分压高时容易进行，在氧分压低时易于解离。红细胞结合和携带 O2 的过程并不影响二价铁离子，也即是说不使之氧化为三价铁离子； Fe3+无带 O2 能力，只见于 2 ???????????????????????名校名 推荐??????????????????? 异常的高铁血红蛋白。 CO与 Hb 的亲和力大于 O2，结合成 HbCO后不能重新分离致使 Hb 丧失运输 O2 和 CO2的机能，此称一氧化碳中毒即煤气中毒。 Hb 结合和携带 O2，并不耗能，而红细胞保持双凹圆形和膜的完整性以及保持低铁 Hb 则需耗能，其能量