饲料常规化验.pptVIP

实验室常规实验操作及注意事项 马焕 粗蛋白的测定 原理： 用浓硫酸分解样品中蛋白质和氨化物使其其中的含氮物转变为氨气被浓硫酸吸收为硫酸铵，硫酸铵在浓碱的作用下放出氨气通过蒸馏，氨气顺冷凝管流入硼酸溶液中形成四硼酸铵，然后用标准盐酸溶液滴定，即可测出含氮量。 步骤： 定氮仪法： ⑴称0.3～0.8克样品于消化管中，加入3 ～5克无水硫酸钠和无水硫酸铜，加入15毫升硫酸，在消化炉上消化（约2小时）呈蓝绿色澄清液体，冷却15分钟，加入20毫升蒸馏水，摇匀。 ⑵蒸馏 接收瓶准备：取25毫升（4%）于锥形瓶，加入4 ～5滴甲基红溴甲酚绿混合指示剂。 分析时，应做所用化学试剂及分析系统的空白试验以补偿他们对试验的影响。 半微量法 ⑴称样品0.5-1克于凯氏烧瓶中，加6.4克混合催化剂（硫酸钾+硫酸铜），加入硫酸12毫升，在消化炉上消化2小时，呈蓝绿色澄清液体，冷却15分钟，加入蒸馏水20毫升，冷却10分钟后转入100毫升容量瓶中。 ⑵取25毫升硼酸溶液加入4滴指示剂，使半微量装置的冷凝管侵入此溶液中。准确移取10毫升样品液注入蒸馏装置的反应室中，加入10毫升（40%）NaOH溶液，加入少许蒸馏水冲洗进样口，塞入玻璃塞并用水密封（防止漏气）此时关闭排废水口和出汽口，蒸馏4分钟后使冷凝管离开液面，冲洗一下末端，继续蒸馏一分钟，然后停止蒸馏（此时将进汽口关闭，出汽口打开排废水口打开）。 注意：做实验前用蒸馏水空蒸一下！ 测定蛋白时指示剂的变色原理 1.有机物中的氨根在高温、CuSO4、浓H2SO4 作用下，消化生成(NH4)2SO4 2NH2+H2SO4+2H＝(NH4)2SO4 （其中CuSO4做催化剂） 2.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3 ，收集于H3BO3 溶液中 　反应式为: 　　(NH4)2SO4+2NaOH＝2NH3+2H2O+Na2SO4 　　2NH3+4H3BO3＝(NH4)2B4O7+5H2O 3. 用已知浓度的HCI标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量 　　反应式为： (NH4)2B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3 4.硼酸是一元极弱酸 , 常温下PH值一般为4.5左右 甲基红 PH突破点4.4～6.2 红～黄 溴甲酚绿 PH突破点3.8～5.4 黄～蓝 蛋白测定的注意事项 粗蛋白测定注意盐酸标定的准确：碳酸钠极易吸潮，称量要快，且称量时只能用药勺取一次，不可反复。第一次滴定碳酸钠时颜色不宜过深，灰黄色即可，以防滴过，造成烧煮后颜色不变蓝。 催化剂足量：6.4克 试样消化的完全（至少两个小时） 半微量测定时，向反应室内加入碱液时，一定先将玻璃塞塞住，再向进样口的漏斗内倒入碱液，轻轻转动玻璃塞使碱液慢慢流入到反应室，防止漏气或液体迸溅到冷凝管内。 空白的变化：重新配制试剂后，一定做空白。 定期测定回收率实验 保证仪器以及盐酸浓度值的准确 水分的测量 原理： 根据样本性质的不同，在特定条件下对样品进行干燥所损失的质量在试样中所占的比例。 ------130度下烘去饲料中蛋白质、淀粉及细胞膜上的吸附水，得到干物质的含量。 步骤： 称出烘干至恒重的称量瓶重（连同盖子一起称量但不盖盖子）----准确称取2.5克左右样品-----在130度烘箱中烘40分钟----加盖，取出，放入干燥器中冷却30min---称重。 水分测量的注意事项 饲料水分测定注意用不同的水分称量盒称量质量有所不同：50x30称量2.5-3.0g，40x25称量2.0g左右。 水分称量盒要保证干燥清洁，每次测定后清洗干净并烘干，测定水分前将水分盒烘恒重。 玻璃质水分盒，用前要回烘至少半小时。 灰分的测定 原理：试样中的有机质经灼烧分解，对所得的灰分的称量。 -----在600℃灼烧完全后所得残渣，用重量百分比的表示。 步骤： 称出恒重的坩埚重----准确加入待测样品2克-----放置在电炉上碳化至无烟-----再移入茂福炉中，600度下灼烧4小时直至样品无碳粒为止------待炉温降至约200度时移入干燥器内冷却30-45分钟后称重。 灰分测定的注意事项 1.茂福炉灼烧4小时后，关闭电源，打开炉门，待温度下降至200℃时取出坩埚，以防坩埚炸裂。 2.每次用完坩埚后，需用蒸馏水冲洗完全，防止残留的灰分对钙磷实验的影响。 3.为避免坩埚盖混淆，需在瓷坩埚上做标记，可用三氯化铁溶液处理，方法为：取0.