高中生物高二生物酶活力测定.pptVIP

第6课时 酶活力的测定 学习目标定位 百1识别酶活力和酶反应速度的关系。2解释果胶酶活力测定 关原理及方法。3探究果胶酶作用的最佳条件。 知识储备区 第6课时 知识·储备区 温故追本溯源推陈方可知新 1.果胶酶是能够分解果胶的多种酶的总称,除了含有果胶 在分解酶外,还含有少量的纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶 和蛋白酶等。工业上生产的果胶酶全部是复合酶。国 产的果胶酶多是利用黑曲霉菌种,经深层液体培养发酵后 制得,含有酯酶、水解酶和裂解酶3个组分。 2.果胶酶的作用:能够将果胶分解,瓦解植物的细胞壁及胞 间层,提高出汁率,并且使果汁变得澄清 3.酶具有高效性和专一性,高温、过酸或过碱的环境都会 导致酶失去活性。 知识储备区 第6课时 4.在下列坐标系中画出温度和pH对酶活性的影响曲线 酶促反 酶 促 反 应 率最适温度瀘度 率最适pHpH 复答案 酶 酶 反应速 促反应速 最适温度温度 率最适pHpH 甲 乙 学习探究区 第6课时 学习·探究区 基础自学落实重点互动探究 探究点一检测果胶酶的活力 本不同条件下,酶的活性是不同的,要定量地比较酶活力的差别 就要进行酶活力的测定。结合教材实验,完成下面的探究内容 1.酶活力单位及其测定方法 (1)酶活力单位是指在一定条件下,1min内能转化mo底 物的酶量。测定过程中温度保持在25℃,其他条件如pH和 底物浓度等均应采用最适条件 (2)测定方法 ①一是测定完成一定量反应所需的时间,所需时间越短,说 明酶活力越高;反之,酶活力越低 学习探究区 第6课时 ②二是测定在一定条件下所催化的某一化学反应的反应速 度,酶催化的反应速度越大,说明酶活力越高;反之,酶 活力越低 果胶酶活力的测定 本(1)实验原理 果胶酶可将果胶水解生成P半乳糖醛酸,产物可用次 碘酸钠法进行定量测定,从而计算出果胶酶的活力 (2)方法步骤 芷温水浴 画 学习探究区 第6课时 步骤操作 提示 两个锥形瓶,1号内加入果 本课栏目开关 胶、果胶酶;2号试管内加保温的目的是使酶 ①保入等量的果胶和蒸馏水,对底物很好地发挥 温均用冰乙酸将pH调至35,作用,温度和pH 放在恒温水浴锅中50℃保都应是最适宜的 温2h 学习探究区 第6课时 从1、2号瓶中分别取5mL这一步的目的是在 本课栏目开关 如反应液加入两个碘量瓶中,碱性条件下碳酸钠 碘加热煮沸,冷却后分别加入提供碱性条件,碘可 1 mLImol/L的碳酸钠溶以和果胶酶的水解 氧 液和5mL01molL的碘产物上半乳糖醛酸 化 液,混匀 作用,生成糖酸盐 学习探究区 第6课时 分别加入2m1molL的硫滴定时加入硫酸的目 酸,用005moM硫代硫酸钠|的是使酶促反应终 本课栏目开关 ③滴定至溶液呈淡黄色,再加入止,然后用硫代硫酸 滴质量分数为0%的淀粉指钠滴定剩余的碘 定示剂,继续滴定至蓝色消失根据化学反应中的定 为止,记录所用硫代硫酸钠的量关系即可求出半乳 体积,分别用A和B表示糖醛酸的量 学习探究区 第6课时 数;A表示样品滴定消耗的硫代硫酸钠 本课栏目开关 ⊙酶活为B表笔白滴定消耗的硫代硫酸钠毫升 (单位) 毫升数;M表示硫代硫酸钠的摩尔浓 =(B 计 度;1表示1mo硫代硫酸钠相当于1mol A)×M 算 -半乳糖醛酸;2表示作用时间;20 1:2 表示反应液总体积_;5表示检测时所 ×20÷5 取反应液的毫升数 学习探究区 第6课时 提 为了得到一种高纯度、高活力的酶制剂,往往要经过一系列 复杂的分离纯化过程,而各个过程中采取的手段可能很温 和,也可能很激烈,这些手段都或多或少地影响到酶的活性。 关为了掌握了解每一个过程中的酶活力的损失程度以及所采 取的手段是否合适,以决定是否进行下一步操作,就必须在 完成了每一步操作后都要对酶活力进行测定