中药制剂检测技术 知识点1：仪器工作原理和操作 项目6任务1知识点1-《中药制剂检测技术》课程电子讲义.docVIP

《中药制剂检测技术》电子讲义 知识点 仪器工作原理 学时 1学时 教学内容 紫外-可见分光光度计的仪器工作原理 1.讲授并探讨紫外-可见分光光度计的仪器工作原理与构造（50min）； 2.讲授并探讨紫外-可见分光光度计操作通法（50min）； 教学重点 仪器构造、标准曲线法、分光光度计的操作步骤 教学难点 （1）光源、单色器、比色皿和光电转换元件等部件的工作原理和特点； （2）用于单组分样品定量分析的标准曲线法； （3）用于混合物样品定量分析的双波长法和导数光谱法。 参考资料 中药制剂检测技术，田友清，人民卫生出版社，2018年 中药制剂检测技术，张钦德，人民卫生出版社，2013年 中药制剂检测技术，卓菊，中国医药科技出版社，2013年 讲义内容： 基本概念：紫外-可见分光光度法(Ultraviolet and Visible Spectrophotometry)系指通过测定被测物质在紫外-可见光区(200~760nm)对光的吸光度或发光强度，进行物质定性定量分析的方法。 仪器工作原理 紫外-可见分光光度仪的构造 紫外可见分光光度计的工作波长范围般为190~900m，其仪器类型很多，但基本结构均由光源单色器、样品池检测器和数据处理系统等部分组成。 紫外-可见分光光度计的工作原理 不同类型的紫外-可见分光光度计的工作原理不同。根据光路数目和波长种类的不同，分为单光東分光光度计和双光束分光光度计，及单波长分光光度计和双波长分光光度计。 1.单光束分光光度计的工作原理 由光源发出的光，经单色器获得一定波长的单色光(平行光)，单色光作为人射光轮流照射参比溶液和供试品溶液，分别测得参比溶液和供试品溶液的吸光度并计算含量的方法。单光束仪器具有结构简单、操作简便容易维修等优点适用于常规分析。由于该仪器对光源强度的稳定性要求较高，，使测定结果受光源强度波动的影响较大，因而给定量分析结果带来较大误差。国产722型.751型.724型英国SP500型以及BackmanDU-8型等均属于此类光度计。其光学系统工作原理如图6-4。 2.单波长双光束分光光度计的工作原理 从光源中发出的光经单色器分光后经反射镜 (或切光器)分解为强度相等的两束光，一束通过参比溶液，另一束通过供试品溶液，检测器在不同的瞬间接收和处理参比信号和供试品信号，并自动比较两束光的强度，其信号差经对数转换系统处理后由显示器显示出透光率吸光度、浓度。也可对不同波长的人射光的测定结果进行扫描绘制吸收光谱，进行定性定量分析。由于两束光同时分别通过参比池和供试品池，双光束分光光度计不仅可以自动扫描绘制供试品的吸收光谱，而且还能自动消除光源强度变化所引起的误差。这类仪器有国产710型、730型、740型等。 3.双波长分光光度计的工作原理 该分光光度计是具有两个并列单色器的仪器，其基本光路如图所示。由同光源发出的光被分成两束，分别经过两个单色器，得到两束不同波长(A，和A)的单色光；利用切光器使两束光以定的频率交替照射同一吸收池后控制系统，最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差A(A=A1-A2)。该方法不用参比池，仅用个吸收池，消除了吸收池及参比池引起的测量误差，提高了测量的准确度。 对于分析多组分混合物、混浊试样(如生物组织液)及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的供试品，利用双波长分光光度法，能提高方法的灵敏度和选择性，并能获得导数光谱。如果能在人和A2处分别记录吸光度随时间变化的曲线，还能进行化学反应动力学研究。 双波长分光光度计的类型有：紫外分光光度计(200~400nm)、可见分光光度计(400~800nm)和紫外可见分光光度计(200~1000nm，多用)。 仪器操作通法 操作通法、注意事项 提问与讨论： 【讨论1】UV仪器的5大构成系统是哪些？ 【讨论2】单色器的功能是什么？两种单色器的特点各是？ 【讨论3】两种比色皿材料的优缺点各是？