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实验设计:激素对血糖浓度的影响
——以家兔为例的实验设计
实验目的:
学习对家兔采血和注射方法, 了解血糖浓度测定方法, 验证激素
对血糖浓度的调节。
实验原理:
对血糖产生影响的激素有很多, 其中使血糖浓度降低的激素为胰
岛素; 使血糖浓度升高的激素有胰高血糖素、肾上腺素、肾上腺皮
质激素、生长素、 甲状腺素。它们对血糖的调节主要是通过对糖代谢
各主要途径的影响来实现的。
本实验将家兔作为实验对象, 对其进行空腹采血后分别注射各激
素,作用一段时间后再分别采血, 同时观察注射激素前后的家兔血糖
浓度的变化,以验证激素的调节作用。
萄糖氧化酶( GOD)将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢,后者
在过氧化物酶( POD)和色素原性氧受体存在下,将过氧化氢分解为
水和氧,同时使色素原性氧受体 4- 氨基安替比林和酚去氢缩合为红
色醌类化合物, 其色泽深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。 其反
应式如下: 葡萄糖 + O 2 (GOD)—→ 葡萄糖酸 + H 2O2
实验对象 :
家兔
实验试剂 :
胰岛素注射液( 40 单位 /ml )、胰高血糖素注射液、肾上腺素注射
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液( 1 ︰1000)、生理盐水、肝素抗凝剂(配成 2500 单位/ml )、凡士
林、二甲苯、葡萄糖标准应用液( 5.55mmol/L )、0.1mol/L 磷酸盐缓
冲液 (pH7.0) 、酶试剂、 酚溶液、酶酚混合试剂、 12mmol/L 苯甲
酸溶液、 100mmol/L葡萄糖标准贮存液
实验器材 :
适量规格注射器、台式磅秤、兔手术台、刀片、干棉球、纱布、
试管、试管架、沸水浴
实验操作:
1. 动物准备及空腹采血
取试管 8 支,编号 1-8 ,分别加入肝素抗凝剂 0.0l ml 。取空腹
16 小时以上的正常家兔四只,分别编号 a、b、c 、d ,称体重(一般
是 2-3kg )并记录。
用耳静脉采血法: 先拔去兔耳缘静脉处的毛, 再用二甲苯擦拭兔
耳部静脉,使其充血,在其周围抹上凡士林 ( 防止污染、润滑),用刀
片轻轻挑破边缘耳静脉,放血入含抗凝剂的试管 1~4,约需 2-3ml ,
边滴边摇,以防凝固。取血完毕,用干棉球压迫血管止血
2.注射激素并再采血
注射液 生理盐水 胰岛素 胰高血糖素 肾上腺素 取血时间
a 0.4mg/kg —— —— —— 30min
b —— 4 单位/kg —— —— 1h
c —— —— 0.4mg/kg —— 30min
d —— —— —— 0.4mg/kg 30min
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皮下注射,观察兔子情况。经各自取血时间后,心脏取血入抗凝
管 5-8 中。采血方法同上。
3. 测定注射前
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