2021年专题新版基因工程知识点归纳.docVIP

专题一 基因工程 一【高考目标定位】 1、专题关键：DNA重组技术所需三种基础工具；基因工程基础操作程序四个步骤；基因工程在农业和医疗等方面应用；蛋白质工程原理。 2、专题难点：基因工程载体需要含有条件；从基因文库中获取目标基因；利用PCR技术扩增目标基因；基因诊疗；蛋白质工程原理。 二【课时安排】 2课时 三【考纲知识梳理】 DNA重组技术基础工具 教材梳理： 知识点一 基因工程概念：基因工程是指根据大家愿望，进行严格设计，并经过体外DNA重组和转基因等技术，给予生物以新遗传特征，从而发明出更符合大家需要新生物类型和生物产品。因为基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工，所以又叫做DNA重组技术。 注意：对本概念应从以下多个方面了解： 操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA分子水平 基础过程 剪切→拼接→导入→表示 结果 人类需要基因产物 知识点二 基因工程基础工具 1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀” （1）限制性内切酶起源：关键是从原核生物中分离纯化来。 （2）限制性内切酶作用：能够识别双链DNA分子某种特定核苷酸序列，并能将每一条链上特定部位两个核苷酸之间磷酸二酯键切开。 （3）限制性内切酶切割方法及结果：①在中心轴线两侧将DNA切开，切口是黏性末端。②沿着中心轴线切开DNA，切口是平末端。 2.DNA连接酶——“分子缝合针” （1）起源：大肠杆菌、T4噬菌体 （2）DNA连接酶种类：E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。 （3）作用及作用部位：E.coliDNA连接酶作用于黏性末端被切开磷酸二酯键，T4DNA连接酶作用于黏性末端和平末端被切开磷酸二酯键。 注意：比较相关DNA酶 （1）DNA水解酶：能够将DNA水解成四种脱氧核苷酸，根本水解成膦酸、脱氧核糖和含氮碱基 （2）DNA解旋酶：能够将DNA或DNA某一段解成两条长链，作用部位是碱基和碱基之间氢键。注意：使DNA解成两条长链方法除用解旋酶以外，在合适高温（如94℃）、重金属盐作用下，也可使DNA解旋。 （3）DNA聚合酶：能将单个核苷酸经过磷酸二酯键连接成DNA长链。 （4）DNA连接酶：是经过磷酸二酯键连接双链DNA缺口。注意比较DNA聚合酶和DNA连接酶异同点。 3.基因进入受体细胞载体——“分子运输车” （1）分子运载车种类：①质粒：常存在于原核细胞和酵母菌中，是一个分子质量较小环状裸露DNA分子，独立于拟核之外。②病毒：常见病毒有噬菌体、动植物病毒等。 （2）运载体作用：①是用它做运载工具，将目标基因转运到宿主细胞中去。②是利用它在受体细胞内对目标基因进行大量复制。 （3）作为运载体必需含有条件：①在宿主细胞中保留下来并大量复制 ②有多个限制性内切酶切点 ③有一定标识基因，便于筛选。 思维探究：知识点3、4、5关键是介绍DNA重组技术三种基础工具及其作用。限制酶──“分子手术刀”，关键是介绍限制酶作用，切割后产生结果。在这部分内容学习时，应关心问题之一是：限制酶从哪里寻求？我们能够联想以前学过内容──噬菌体侵染细菌试验，进而认识细菌等单细胞生物轻易受到自然界外源DNA入侵。那么这类原核生物之所以长久进化而不绝灭，有何保护机制？进而联想到可能是有什么酶来切割外源DNA，而使之失效，达成保护本身目标”。这么就对“限制酶关键是从原核生物中分离纯化出来”认识提升了一个层次。 基因进入受体细胞载体──“分子运输车”学习内容，不能仅仅着眼于记住这多个条件，而应该深入思索每一个条件内涵，经过深思熟虑，才能真正明确为何要有这些条件才能充当载体。 教材拓展： 拓展点一 限制酶所识别序列特点 限制酶所识别序列特点是：展现碱基互补对称，不管是奇数个碱基还是偶数个碱基，全部能够找到一条中心轴线，图，中轴线两侧双链DNA上碱基是反向对称反复排列。如： 以中心线为轴，两侧碱基互补对称； 以 为轴，两侧碱基互补对称。 拓展点二 DNA连接酶连接是什么部位？ DNA连接酶是将一段DNA片段3′端羟基和另一DNA片段5′端磷酸基团上羟基连接起来形成酯键，而不是连接互补碱基之间氢键。 基因工程基础操作程序 教材梳理： 基因工程基础操作步骤为四步曲：目标基因获取；基因表示载体构建；将目标基因导入受体细胞；目标基因检测和判定。 一．目标基因获取 1．目标基因：关键是指编码蛋白质结构基因。 2．目标基因获取方法： 基因组文库 从基因文库中获取 cDNA文库 人工合成 逆转录法、依据已知氨基酸序列推测脱氧核苷 （真核生物） 序列、PCR技术扩增目标基因、DNA合成仪合成等。 注:需要关键复习内容有：a基因组文库和部分基因文库含义及区分（教材P10表格