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氯化两面针碱的体内抑瘤作用及机 制 【摘要】 目的研究氯化两面针碱 对S180荷瘤小鼠的的抗肿瘤作用及机制。 方法以荷瘤小鼠实体瘤瘤重为实验指标评 价氯化两面针碱对 S180移植性肉瘤的抑制 作用，免疫组织化学方法检测肿瘤组织中的 p53、Bcl-2和Bax蛋白。结果氯化两面针碱 5和10 mg?kg-1剂量对S180肉瘤生长的抑 制率分别为％脩口 ％ p53、bcl-2蛋白的表 达率明显低于对照组，bax蛋白表达率高于 对照组。结论氯化两面针碱对小鼠 S180肉 瘤有抑制作用，其机制可能与影响癌基因的 表达有关。 【关键词】两面针氯化两面针碱抗肿瘤 中药 Abstract : ObjectiveTo investigate the anti-tumor effect of Nitidine chloride in vivo on Sarcoma180mice and its mechanism. MethodsThe antitumor effect of Nitidine chloride was evaluated by tumor weight. The expressions of p53 、bcl-2 and bax proteins in the tissue were studied by immunohistochemistry. ResultsNitidine chloride significantly inhibited the growth of tumor, the inhibitory rate at the dose of , 5, 10mg kg - 1 was % , % and % respectively. The expression of p53, bcl-2 proteins was decreased obviously in the Nitidine chloride group as compared to control group, and the expression of bax was increased. ConclusionNitidine chloride has significant antitumor effect in vivo, and its influence on oncogene may be one of its anti-tumor mechanism. Key words : Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC; Nitidine chloride; Anti-tumor; Traditional Chinese medicine 氯化两面针碱是从广西特有药用植物 两面针 Zanthoxylum nitidum (Roxb)DC 的 根中分离到的具有抗肿瘤活性的生物碱， 据 文献:1]报道，对LEWIS肺癌、人体鼻咽 癌、肝癌、慢性粒细胞白血病等均有抑制作 用。本课题组前期研究也证实:2],氯化两 面针碱在体外能显着抑制口腔鳞癌 KB细胞 的增殖，可导致细胞周期 G2/M期阻滞，并 诱导细胞凋亡。为较系统地研究氯化两面针 碱的抗肿瘤活性，本实验采用小鼠移植性肉 瘤S180模型，评价氯化两面针碱的体内抗 肿瘤活性，并研究氯化两面针碱对原癌基因 和抑癌基因的影响，探讨其可能的作用机制， 为氯化两面针碱的进一步研究及开发利用 提供依据。 1材料与仪器1试剂和仪器 氯化两面针碱由广西中医药研究所分 离提纯，阳性对照药环磷酰胺购自江苏恒瑞 医药股份有限公司；BCL-2, Bax, p53兔抗 小鼠多克隆抗体购自 SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY司：即用型二步法 PV6001 兔二步法检测试剂盒、DAB显色试剂盒购自 北京中杉金桥生物技术有限公司；超净工作 台：苏州净化设备厂；病理组织切片机、病 理图像分析仪：德国 Leica公司。2动物 昆明小鼠，SPF级，雌雄各半，体重g, 由广西医科大学实验动物中心提供， 动物合 格证号：SCXK2003-0003小鼠S180肉瘤荷 瘤鼠购自广西中医药研究所， 由本实验室接 种保存。 2方法 小鼠S180肉瘤造模方法及检测指标 从S180传代小鼠腹腔抽取乳白色瘤液 以生理盐水稀释，调节细胞密度为 1X1010?L-1。台盼蓝染色，镜检细胞存活 率N 95%取待接种小鼠消毒腋下皮肤，于 超净工作台上将瘤细胞悬液以每只 ml接种 于小鼠右侧腋窝皮下，30 min内接种完毕。 接种完成小鼠于动物房饲养，自由摄食饮水。 接种24 h后开始给药，分别设对照组，氯 化两面针碱高、中、低剂量组， CTX组，每 组10只，1次/d。给药10 d结束后，次日 处死全部动物，剥离瘤块，生理