临床色谱质谱检验技术：第一章 质谱技术概论（二）.pptVIP

基本原理： 基质辅助激光解析电离源（matrix-assisted laser desorption/ionization ，MALDI）是将待测物与固体有机小分子基质以1:5000以上的比例混合后以激光照射，基质在吸收激光能量后将其均匀传递给待测物分子，使之气化并形成离子。 基质辅助激光解析电离源 核心： 激光：能量密度极大的单色光（波长单一的光束），用于提供激发样品的能量； 基质：MALDI的重要核心组成，主要作用是吸收激光能量并将能量传递给待测物分子并使之离子化。 基质辅助激光解析电离源 基质的物质必须具有的特性 溶解性 吸光性 反应性 挥发性 解吸作用 可检测几十万甚至几百万质量数的分子； 电离方式对样品的破坏性小，质量测定范围大，分子量测定准确； 以单电荷离子为主，因而质谱图较为简单； 与时间飞行质谱仪联用（MALDI-TOF-MS），分析时间快，原则上它可以在 一次电离事件中给出所有离子的质谱图； MALDI-TOF-MS是强力支持蛋白质组学分析的高性能设备。 基质辅助激光解析电离源特点 在临床实验室中，成功应用于微生物鉴定工作； 采用该技术后，微生物鉴定的时间明显缩短，鉴定的范围也更广，特别是对于难鉴定、少见的病原微生物，质谱技术就更具有优势；同时具有准确、稳定、高通量、低成本等特点； 生物梅里埃公司于推出了首个同时在美国和中国获得政府部门批准的用于临床检验使用的MADLI-TOF-MS系统，可用于致病细菌和酵母菌的临床快速鉴定，也是第一种能够在数分钟内检测致病微生物的系统；结合快速的药敏试验，能在很短的治疗时间窗口内提供诊断和治疗意见，这将降低发病率和死亡率。 MADLI-TOF-MS 三、小结与思考 《临床色谱质谱检验技术》 掌握质谱离子源 今天重点讲述了几大类离子源？ 其特点分别是怎样的？ Thanks 离子源是使样品分子、原子或自由基转变为气相离子的器件，是质谱仪的门户。离子源及相应的电离技术的革新一直推动着MS的跨越式发展。 * 离子源——将待分析样品电离，得到带有样品信息的离子 * 灯丝：在通电条件下，灯丝温度可达2000度，炙热的灯丝发射出自由电子。 电子束被加在灯丝（阴极）与电离室间的电压加速，获得足够的动能（通常是70eV）。高能电子经准直后，从狭缝射入高真空的电离室中，使样品分子电离。 穿过电离室的电子被电子阱（阳极）接收； 为提高电离效率，在灯丝和电子阱两端安置一对永久磁铁，产生与电子束入射方向近乎平行的磁场，使电子在电离室内由于惯性和洛仑磁力作用而螺旋前进，增加样品分子作用的几率； 为减少与电离室内壁的中和碰撞，离子一旦生成，立即就被引出电压加速，离开电离室，经聚焦后进入分析器； 电离室中的加热器（150-250度）是为了在保证样品不发生热分解的前提下，避免分子冷凝，以及减少样品残留一起的记忆效应。 * 这是因为电子的能量大于10ev时才会时有机物电离，产生分子离子。电子能量升高，电离效率会升高，分子离子和碎片离子的强度都会升高，在70ev时达到最大效率，超过70ev时电离效率会下降，分子离子强度下降，但碎片离子可能会增多。 * 雾化气使LC导入的液体样品气化 喷雾针上的高压使液滴带电 随着带电液滴中溶剂的挥发形成了离子 * 电晕放电针使离子源的 N2 或 O2 带电 带电荷的N2 或 O2 传递电荷给气化的溶剂分子 带电荷的气化溶剂又将电荷转移给分析物 * 属于大气压电离源，是在大气压而非高或低真空环境中实现的一类电离技术。 * 样品蒸发、解离、原子化、电离等过程 * 第一章 质谱技术概论 《临床色谱质谱检验技术》 一、复习 二、质谱离子源介绍 主要内容 《临床色谱质谱检验技术》 三、小结与思考 一、复习 《临床色谱质谱检验技术》 质谱是什么？ 质谱能做什么？ 质谱有何独到之处？ 质荷比 质谱图 同位素 分辨率 …… 重要概念 二、质谱离子源介绍 《临床色谱质谱检验技术》 质谱仪的原理 气态 液态 固态 样品引入 色谱 直接输注 流动注射分析 样品靶 …… 离子源：将待分析样品电离，得到带有样品信息的离子 固体样品 液体样品 气体样品 EI CI APCI MALDI ESI APPI 转化成溶液 转化成固体 转化成气体 根据待分析物的化学性质 根据待分析物的化学性质 离子源 电子电离源（Electron Ionization，EI ） 应用最早且最为广泛的一种离子源； 基本原理：利用高能电子与中性气态分子发生作用，使后者电离，电离生成的碎片离子可用于未知化合物的结构推断； 主要组成： 灯丝 电离室（离子盒） 电子阱（收集级） 永久磁铁 离子光学系统 加热器 电子电离源（Electron Ionization，EI ）