临床色谱质谱检验技术：第五章 液相色谱质谱技术（一）.pptVIP

Peiyuan Yin, Andreas Peter,et al.Clinical Chemistry,2013, 59(5): 833–845 检测方法的国内外现状 其他—采血管 塑料材质可能影响某些物质的浓度和稳定性； 添加剂或塑料溶出的小分子或会造成干扰（干扰峰、浓度变化、基线抬高） 其他—试剂、消耗品 试剂：尽量选用质谱级试剂；使用去离子水或更高纯度的水； 消耗品：如96孔板，PCR膜、离心管。不同厂家的消耗品由于工艺和原材料的差异，可能会带来不同的干扰，方法开发前应尽量多准备几个品牌的同类耗材供考察； 检测方法的国内外现状 消耗品—96孔板 Donald H. Chace, Zuzheng Luo, et al. Clinica Chimica Acta 411 (2010) 1284–1286 聚苯乙烯 聚丙烯 技术可行性 讨论难点、待解决的问题（如前处理、标本采集运输、干扰等） 社会可行性 分析项目对社会的影响，包括法规、政策等 实验环境和样品准备 样本稳定性、实验条件—温湿度，是否需避光、除紫外等 标准品、内标品调研？是否有稳定供货 成本可行性 仪器设备、试剂耗材的选择与成本预算 临床认可度及市场分析 项目可行性评估 初步的实验方案设计与准备 试验方案 仪器、设备、试剂、耗材请购 五、小结与思考 《临床色谱质谱检验技术》 液相色谱质谱联用技术出现的原因？ 液相色谱质谱联用仪的组成及工作原理？ 液相色谱质谱联用仪的接口问题？ 液相色谱质谱联用方法建立步骤？ Thanks 强调第四章的重要性 * 鉴别能力强，可给出化合物的分子量、分子结构碎片等信息 * 已知化合物中约80%的化合物是亲水性强、挥发性低的有机物，热不稳定化合物及生物大分子，这些化合物的分析不适宜用气相色谱分析，只能依靠液相色谱。LC和MS联用的推动力——优势互补，应用更广。 液相色谱-质谱联用仪是液相色谱与质谱联用的仪器。它结合了液相色谱仪有效分离热不稳性及高沸点化合物的分离能力与质谱仪很强的组分鉴定能力。是一种分离分析复杂有机混合物的有效手段。 * 质谱技术的发展过程中，后期主要解决的就是“接口问题”，实现联用技术。50年代后，GC-MS联用得到发展，1989年第一台商业化液相色谱串联质谱仪问世。以及大气压离子化的成功应用，LC-MS在临床检验上的应用得到长足发展；质量分析器和离子源的不断革新是贯穿其中的两条主线。 质量分析器：扇形磁场质谱仪、双聚焦质谱仪、飞行时间质谱仪、离子回旋共振质谱仪、四级杆质谱仪、离子阱质谱仪、傅里叶变换质谱仪，到如今的三重四级杆、四级杆飞行时间质谱、线性离子阱、轨道阱等。 离子源：无机电离技术如气体放电电离、火花电离、辉光放电电离和热电离等；有机电离技术如电子电离、化学电离、电喷雾电离、大气压化学电离、电感耦合等离子体、快原子轰击电离、基质辅助激光解析电离等。 联用技术：与单一方法相比，不仅能发挥各自的优势，还能实现1+12的效应。如LC是一种很好的色谱分离手段，但定性能力不足；MS尤其是串联MS和高分辨质谱，可对m/z不同的离子加以分离，但对m/z相同的不同离子却无能为力；LC-MS则集合了色谱分离与质谱分离的优点，可进行更准确的定性、定量分析。 从分离技术的角度来看，MS可视为一种检测手段，而从MS角度看，分离技术可视为一种进样方式。 * 真空系统：机械泵，分子涡轮泵。只有在足够高真空下，离子才能从离子源到达检测器，否则灵敏度低。 * * 若LC洗脱液直接进入质谱的高真空区，则每分钟增加的气体量为上百升。因此，需要一个接口，将洗脱液及样品气化，分离除去大量的洗脱液分子，是样品分子电离。LC流出物如果全部气化，可产生500~1000 ml/min的气体，而MS采样仅能接受10~50 ml/min的气体； * * 质谱的发展过程中……，为了解决“接口”问题，人们开始致力于液-质联用接口技术的研究。在开始的20 年中处于缓慢的发展阶段，研制出了许多种联用接口，但均没有应用于商业化生产。直到大气压离子化（atmospheric-pressure ionization, API）接口技术的问世，液-质联用才得到迅猛发展，广泛应用于实验室内分析和应用领域。 /bbs/redirect.php?tid=21150goto=lastpost * * * 滥用药物监测、睾酮定量检测 * 以液相色谱质谱应用比较广的遗传代谢病为例，高苯丙氨酸血症是遗传代谢病的一种，为了进行鉴别诊断，需要测定蝶呤谱来鉴别是哪一种HPA类型？ * 外源性物质包括：处方药物、滥用药物、补充剂、环境物质、局部软膏等；要明确这些物质的检测标本类型及采样时间等需要了解外源性物质的药代动力学。 * （1）药物浓度：环保霉素在体内的代谢物有四种类型，活性？ （2）标本