吉林省食品安全地方标准 豆芽中植物激素6-苄氨基嘌呤的测定.docVIP

吉林省卫生厅发布DBS22吉林省食品安全地方标准2012- 吉林省卫生厅发布 DBS22 吉林省食品安全地方标准 2012-××-××实施 2012-××-××发布 豆芽中植物激素6-苄氨基嘌呤的测定-高效液相色谱法 Determination of plant hormones-6-Benzylaminopurine in bean sprouts-High performance liquid chromatography method (送审稿) DBS22/003-2012 ICS： 标准分类号： 备案号： 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009和GB/T 20001.4-2001标准编写规则 第4部分:化学分析方法给出的规则起草。 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由吉林省质量技术监督局提出并归口 。 本标准起草单位：国家农业深加工产品质量监督检验中心、吉林省产品质量监督检验院。 本标准主要起草人：石金娥、华蕾等。 豆芽中植物激素6-苄氨基嘌呤的测定 1 范围 本标准规定了豆芽中植物激素6-苄氨基嘌呤测定的高效液相色谱方法。 本标准适用于豆芽中6-苄氨基嘌呤的含量测定。 本标准方法检出限为0.05 mg/kg。 2 规范性引用文件 本标准内容引用了下列文件中的条款。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注明日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。 GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样中的6-苄氨基嘌呤经酸化乙腈-水溶液超声提取后，高效液相色谱法测定，以保留时间定性，外标法定量。 4 试剂和材料 除另有说明外，所有试剂均为分析纯，实验用水为GB/T6682规定的一级水。 4.1 乙腈：色谱纯。 4.2 甲醇：色谱纯。 4.3 冰醋酸。 4.4 6-苄氨基嘌呤：含量≥97%。 4.5 乙腈-水溶液：量取60mL乙腈（4.1），加入40 mL水中，混匀。 4.6 样品提取液：每 100 mL乙腈水溶液（4.5）中加入乙酸50 μL。 4.7 6-苄氨基嘌呤标准储备液（1.0 mg/mL）：准确称取 0.0500 g 6-苄氨基嘌呤标准品，用甲醇（4.2）溶解并定容于50.0 mL容量瓶中，4℃下保存，有效期2个月。 4.8 6-苄氨基嘌呤标准使用液：准确吸取 5.0 mL 6-苄氨基嘌呤标准储备液（4.7）于100 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，此溶液浓度为50.0 mg/L。 4.9 微孔滤膜：0.45 μm，水相。 5 仪器和设备 5.1 液相色谱仪：配有紫外检测器。 5.2 天平：感量0. 1 mg和0.01 g。 5.3 超声波清洗器：功率大于180 W。 5.4 离心机：转速不低于4000 r/min。 5.5 组织捣碎机。 6 分析步骤 6.1 试样制备 样品经组织捣碎机捣碎混匀后备用。 6.2 试样处理 称取10 g（精确到0.01 g）试样（6.1）于50 mL比色管中，加入样品提取液（4.6）并定容，超声提取30 min，取上清液以不低于4000r/min离心10 min，过0.45 μm微孔滤膜，供液相色谱分析。 6.3 高效液相测定 6.3.1 a） 色谱柱：Eclipse XDB-C18，4.6 mm×250 mm，5.0 μm或等效色谱柱； b） 柱温：28 ℃； c) 测定波长：267 nm。 d） 流动相：甲醇+乙腈+水=40+5+55，体积比； e） 流速：1.0 mL/min； f） 进样体积：10.0 μL； 6.3.2 根据保留时间一致性进行定性识别的方法，根据6-苄氨基嘌呤标准样品的保留时间，确定样品中6-苄氨基嘌呤的色谱峰。有阳性样品检出时应采用其他方法进一步定性确证。 6.3.3 分别吸取标准使用液（4.8）用样品提取液（4.6）稀释，配制成浓度依次为0.02 mg/L、0.10 mg/L、0.50 mg/L、1.00 mg/L、5.00 mg/L、10.00 mg/L的标准工作液。将标准工作液分别进样，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中的6-苄氨基嘌呤均应在仪器测定的线性范围内。 6-苄氨基嘌呤标准样品及加标试样图谱参见图A.1、A.2、A.3。 7 结果计算 测定结果可由仪器工作站自动计算，也可按式（1）计算： …………………………………………….（1） 式中： X ——样品中6-苄氨基嘌呤的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； c ——由标准曲线计算得试液中6-苄氨基嘌呤的浓度，单位为毫克每升（mg/L）； V ——试样最终定容体积，单位为毫升（mL）； m ——称取样品质量，单