基于金银合金的新型SERS纳米探针用于生物医学检测研究.pdfVIP

博士学位论文 摘 要 表面增强拉曼散射光谱 （SERS ）不仅可提供分子的振动信息，而且由于其窄 散射峰适用于多重分析，已广泛应用于生物医学成像、生物传感及疾病诊断中。 特别是近年来，胶体等离子体贵金属纳米材料的发展，使 SERS 技术在复杂生物 体系分析检测中的应用受到了越来越多的关注。然而，现有 SERS 检测方法在生 物医学成像和生物传感方面仍面临许多挑战。首先，常规 SERS 基底一般由金或 银纳米材料制成，金纳米材料的 SERS 增强效果不够理想，虽然银纳米材料的 SERS 增强效果比较好，但其化学稳定性差、生物毒性大。其次，常用于生物体 系检测的拉曼报告分子在指纹区域（1800 cm- 1 ）具有多个拉曼峰，这些拉曼峰 容易与内源性物质的拉曼峰重叠，会严重影响分析检测的准确度。另外，现有SERS 检测方法通常更关注单一目标物的检测，很少有研究致力于开发便捷可靠的SERS 传感阵列以用于多种疾病标志物的同时分析检测。 本论文以 SERS 技术作为主要分析手段，首先制备了具有优良 SERS 增强性 能的金银合金纳米颗粒，再结合细胞静默区拉曼报告分子以及传感阵列策略，构 建了一系列用于生物医学成像及疾病标志物检测的 SERS 传感新方法。具体研究 内容如下： （1）炔基-DNA-功能化金银合金纳米颗粒探针 （Alkyne-DNA-AuAgNPs ）用 于活细胞内核酸内切酶活性的比率型 SERS 成像分析。合成了合金化Au/Ag 纳米 粒子（AuAgNPs ）作为SERS 基底，该基底同时具有类似于金的化学稳定性、生 物相容性和类似于银的等离子体增强性能。使用 4-巯基苯乙炔（MPAE ）和标记 3- （（4- （苯基乙炔基）苄硫基）丙酸（PEB ）的单链DNA （ssDNA ）功能化AuAgNPs ， 以炔烃作为报告分子，避免了复杂组分对 SERS 信号的干扰。核酸内切酶存在时， ssDNA 被切割，PEB 分子从颗粒表面释放，PEB 中炔基的SERS 信号（2215 cm- 1 ） 降低，MPAE 中炔基的SERS 信号（1983 cm- 1 ）保持不变，实现了基于比率峰强 度 I1983/I2215 对体外和活细胞内的核酸内切酶的高灵敏、无干扰分析检测。 （2 ）多孔SiO 包覆的炔烃功能化的金银合金纳米颗粒 （AuAg@p-SiO NPs ） 2 2 用于活细胞中H O 的比率型SERS 成像分析。制备了超薄多孔SiO 涂层的Au/Ag 2 2 2 合金纳米粒子（AuAg@p-SiO NPs ），这种新型 SERS 基底不仅具有 AuAgNPs 的 2 优良特性，而且超薄多孔 SiO2 壳避免颗粒团聚的同时消除了传统有机封端配体的 使用，使颗粒具有干净表面和高度可获得性热点。使用 4-巯基苯硼酸（MPBA ） 和4-巯基苯乙炔（MPAE ）功能化AuAg@p -SiO NPs ，以多巴胺（DA ）作为桥联 2 分子，通过形成硼酯键和酰胺键，将 3- （（4-苯基乙炔基）苄硫基）丙酸（PEB ） II 基于金银合金的新型SERS 纳米探针用于生物医学检测研究 结合到纳米颗粒表面。H O 存在下，硼酯键转换为苯酚，PEB 衍生物分子从 2 2 AuAgNP s 的表面释放，2214 cm- 1 处 PEB 的 SERS 信号显著降低，1986 cm- 1 处 MPAE 的SERS 信号保持不变，依据