《免疫学检验技术》 5.免疫复合物检测 24.4 IC检测.pptxVIP

第二十四章超敏反应性疾病免疫学检验 知识目标 掌握：激发试验的概念、类型与临床；血清IgE的检测方法、临床意义与应用评价 熟悉：药物过敏筛选实验技术类型及应用 了解：循环免疫复合物检测技术 能力目标 1.解释激发试验的原理及正确结果判读 2.运用ELISA和IBT检测SIgE。 思政-素质目标 耐心、责任心、质控意识和生物安全意识 教学目标 1. 激发试验的概念、类型与临床应用 2. 血清IgE的检测方法、临床意义与应用评价 3. 药物过敏筛选实验技术类型及应用 4. 循环免疫复合物检测技术 本章要点 目　录 二、抗原非特异性CIC检测技术 三、CIC检测方法评价及应用 四、沉积于组织中IC 的测定 一、基本概念 一、基本概念 免疫复合物（immune complex, IC）:指由抗原与相应 的抗体结合而成的复合物 局部免疫复合物：沉积在机体的某一局部 循环IC（circulating IC, CIC）：血液中存在的IC 抗原特异性IC 抗原非特异性IC 检测已知抗原与相应抗体形成的IC 不考虑形成IC抗原的性质，检测未知抗原与相应抗体形成的IC总量 二、抗原非特异性CIC检测技术 CIC：分子量600kD以上，沉降系数＞19S 热聚合IgG（HAHG)： 作为参考标准品，绘制标准曲线进行CIC定量或测定A值代表CIC相当于HAHG的含量 CIC的检测方法：按抗体分子在结合抗原后发生的物理学和生物学特性的改变而设计，主要方法： PEG比浊法 ELISA法 Raji细胞法 抗球蛋白技术—mRF凝胶扩散试验 以ELISA法为例 1.基本原理 ELISA法测定的CIC，是能够结合C1q的 IgG类抗体与其特异性抗原形成的CIC 2.技术要点 将聚苯乙烯包被上C1q，加入受检血清， CIC中IgG的Fc段与C1q结合，再加抗人IgG·HRP， 形成C1q-CIC-抗人IgG·HRP复合物，加底物显色 灵敏度高于PEG比浊法，可检测到0.1µg/mL 重复性好，相对稳定； C1q制品不易精制, 纯品不稳定，只能检出与补体结合的CIC 3.方法评价 以ELISA法为例 三、CIC检测方法评价及应用 1. 方法学待改进 2.IC机理研究待深化 （一）检测方法评价 (二)临床应用 对于明确的免疫复合物病，如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、部分肾小球肾炎和血管炎等 辅助诊断 评估疗效和疾病进展 常用免疫組化技术 如荧光免疫组化技术检测标本组织中的Ig和补体，荧光显微镜下观察荧光染色的IC沉积物的分布和性质 了解受累组织的成分、构型和特定部位 评估疾病的严重程度和治疗方案 四、沉积于组织中IC 的测定