药品生物检定技术简介教学内容.ppt

药品生物检定技术简介;第一节 无菌检查 无菌检查法-----检查药品 、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。 它是判断供试品是否被微生物污染的一种方法。 ;一、技术要求： ①纯净度＜10000级的局部纯净度100级单向流空气区域内。 ②全过程无菌操作。 ③单向空气区、工作台面、环境符合国家相关标准。 ;二 . 培养基（Medium） 1、培养基：是供微生物、植物、动物组织生长 和维持用的人工配制的养料（营养物质） 保存： 保存于2-25℃。 应防潮、避光、阴凉处保存 碳水化合物、含N物、无机盐 一般含有： 维生素、H2O 、 抗菌素、色素 ;2、种类 ①硫乙醇酸盐流体培养基：需氧菌、厌氧菌培养基 ②改良马丁培养基：（真菌培养基） ③选择性培养基 对氨基苯甲酸培养基（磺胺类） 聚山梨酯80（非水溶性供试品） ④营养肉汤培养基 ⑤营养琼脂培养基： ⑥0.5%葡萄糖肉汤培养基： ⑦改良马丁琼脂培养基： ;聚山梨酯80（20，40，60，65，80，85） （吐温80） tween 80： 0 / W 脂肪酸山梨坦（20，40，60，65，80） （司 盘） Span ： W / 0 亲水，亲油基团的表示方法 ;3、培养基的适用性检查： ①无菌检查： 随机抽 ＞ 5瓶（或支） 生长 14天，应无菌 ②灵敏度→证明所加的菌种能够在培养基 中生长良好 。 三.方法验证试验： 正式测定之前，需要先测定供试品是否具有抑细菌和抑真菌作用、避免假阴性出现。 ;（四）无菌检查法： 1、检查数量：指一次试验所用供试品最 小包装容器的数量。 例：2支（瓶）/2板×12粒 检查量：指一次试验所用供试品的总量 （g 或 ML） 例： 2×10=20ML 24×0.25=6g 2、对照试验： 阳性对照 阴性对照;3、检查方法： a、薄膜过滤法：应用广、准确性高，适用 于任何药品、尤其是具有抑菌作用的。 b、直接接种法：操作简便，适用于无 抑?? 作用的供试品。 （2）培养观察：培养14天，无细菌生长。 ;（五）结果判断： 1、若澄清， 无菌↘ 符合规定 虽浑浊，但无菌→ 符合规定 2、任一管浑浊有菌生长→ 不符合 3、若试验无效 → 重试 ; 第二节 微生物限度检查 目的： 判断药品被污染的程度，细菌数 越多→药品受污染大 →安全性越差。 1. 定义—检查非规定灭菌制剂及其原料，辅料受微生物污染程度的方法。 项目包括：细菌数、 真菌数、 酵母菌数、控制菌数。 ;2、技术要求： ①结净度10000级以下 ②区域、工作台、环境符合国家标准 ③加入辅料（表面活性剂、中和剂、灭活剂）---- 证明其对微生物生长存活无影响 ④ 30-35℃（细菌） 23-28 ℃（真菌、酵母菌） 35-37 ℃（控制菌） ⑤结果报告以1g、1mL、10g、10mL、10 Cm2 ;3、检验量：一次试验所用供试品的量 （g、ml、cm2） 一般供试品为：10g、10mL。 化学膜剂：100 cm2 中药膜剂：50cm2 4、供试品制备：按照《药典》规定制备 ;5、菌种： A.细、真、酵 ，对照试验菌种 ： 大肠埃希菌、 金葡菌、枯草、白色念朱菌、黑曲霉 B.控制菌，对照试验菌种：大肠、金菌、乙型 副伤寒、铜绿假单胞菌、芽孢梭菌 传代次 数： 〈 5 代。 6、培养基：制备的灭菌条件：121℃ 20min 7、方法验证 ： 确证所用