成人呼吸系统感染性病原如何诊断专家意见一览.docxVIP

近日，《中华结核和呼吸杂志》发布《成人呼吸系统感染性疾病病原学诊断专 家意见》，旨在规范标本的采集、储存、运输、检测过程，提高对感染性呼吸 道标本检测效率和准确率，同时对各种检验方法的结果判读进行归纳总结，为 临床治疗方案的选择提供帮助。 呼吸系统感染性疾病是由细菌、病毒、支原体、真菌和寄生虫等多种微生物引 起的感染性疾病，是临床常见病和多发病，病情严重程度因致病原、感染部位、 被感染人群以及合并基础疾病的情况不同而表现各异。 呼吸道病原学检测标本的采集方法 呼吸道病原学标本的采集方法见表lo 表1呼吸道病原学标本类型及采集方法 标本类型 采集方法 痰液 自主咬,诱驟 拭子 口咽拭子，鼻咽拭子 保护性毛刷 经支气管镜引导下采集 好A 丁4渚由皿 经人工气道，在负压吸引装置前连接无菌集痰器，操作前应听蠡錦严 5体位引流5,5 根据病变咅典择潘先叶段，使用水国市段飆鼬行 灌注并回收，通过细胞计数进行灌洗液质量控制，回收率应在 30%lU±细菌培养标本量应 根据病变咅典择潘先叶段，使用水国市段飆鼬行 灌注并回收，通过细胞计数进行灌洗液质量控制，回收率应在 30%lU± 细菌培养标本量应21 mL ,真菌培养N10 mL,分枝杆菌培养 胸腔积液 10 mLo如送检结核舞T细胞检测(T-SPOT )还需注意添 加肝素抗凝 可选择电视辅助胸腔镜手术,气管-支气管内超声引导下肺组 组织活检标本 织或淋巴结活检,经气管镜M活检术，CT或B超引导下经皮 肺穿刺活检术。 蠢管肺泡灌洗 标本的运送、储存和预处理 标本的运送和储存原则 首先标签应准确，信息完整，贴在容器上，而不是容器盖上。不同病原体检测 标本的采集和转运原则见表2。 表2不同病原体检测标本的采集,收集和转运原则 不同类型标本采集量、保存和转运时间见表3。 表3不同时间标本的采集量,保存和转运时间 标本类型标本采ma收集装置. 标本类型标本采ma 收集装置.保存温度和转 运时间 黒清学标10 ml血液或5 ml血清 血清分离胶促凝采血管, 室温，2h内 髒蒙抗體佥豔矗番翳（根密闭容器，室温?内 核酸扩増 10 核酸扩増 10 ml血液或5 ml血浆 含EDTA采血管，室温， 2h内 2 ml 2 ml病毒转运培养基 密闭容器，室温，2 h内 2 .针对不同病原体的检测方法 标本采集后应及时进行质量控制，合格的标本应尽可能短期内送检。某些特殊 病原体标本的转运、保存和检测方法见表4。 表4特殊病原体标本的转运、保存条件及检测方法 特殊病原体 标条件和 时间 标本保存条件 检测方法 细菌 无蘭容器,至温t 2h 4 °C , 24 h 革兰染色，定量培养 努卡菌 革兰染色,弱抗酸染色，培养 军团菌 培养，核酸检测，抗原检测 頁菌 无菌容器，室温， 2h 4 °C , 24 h 氢氧化钾压片或荧光白染色，真菌培 养 曲霉 氢氧化钾压片或荧光白染色，真菌培 养，半乳甘露聚糖（GM ）阈佥 啪子菌 六肢银染色,核酸检测,抗原检测 皺菌 墨汁染色，真国培养，隐球园英膜多 糖抗原 分枝杆菌 无困容器，室温， 2h 4°C , 24 h 涂片抗酸染色，培养，瞄检测 病毒 病毒转运培养基， 室温，2h 4°C , 5d ; -70°C , 5d 核酸检测，抗原检测，分离培养 寄生虫 无菌容器，室温， 2h 4 °C , 24 h 直歯检，核酸倒，质检则 病原特殊结 构 Hiss英膜染色,Loeffler多色亚甲蓝 鞭毛 银盐染色法，复红染色法 芽抱 孔雀绿瞧法，石碳酸診染色法 呼吸道病原体检测方法的优缺点 不同检验方法的优缺点见表5。 表5病原体不同检测方法的优缺点 检测方法优点缺点聚合酶链反应（如直接PCR. mPCR. 简单，快速，便宜，可危RT PCR、qPCR）假阳性率高，污染风险高，引物可能失效，用于 诊断常见和某些特殊病原体（如肺弛子菌、非结 核分枝杆菌等）等温（恒温）扩増技术（ 检测方法 优点 缺点 聚合酶链反应（如直接 PCR. mPCR. 简单，快速，便宜，可危 RT PCR、qPCR） 假阳性率高，污染风险高，引物可能失效，用于 诊断常见和某些特殊病原体（如肺弛子菌、非结 核分枝杆菌等） 等温（恒温）扩増技术 （LAMP、NASBA、快速，敏感，特异 RPA和SDA ） 假阳性率高，污染风险高，引物可能失效，用于 诊断常见和某些特殊病原体 芯片技术（多病原等温 扩増微流控芯片技术、 POCT等） 靶向通用引物多重PCR 和一代测序（如16s、 ITS）靶向NGS 宏基因组NGS 血清学试验（如醃联免 疫和免疫层析等检测） 涂片显微镜检查 病原国培养 快速，敏感，特异，污染率低大部分检测仍需在扩増前进行样本和速算提取， 无需PCR认证 未完全实现样品前处理自动化 可对病原体按照科