植物生理学实验：实验一 植物组织的水势测定（小液流法）.pptVIP

Company Logo LOGO 实验理论基础：水势 水势：在等温等压下，体系（如细胞）中的水与纯水之间每偏摩尔体积的水的化学势差。用符号Ψ或Ψw表示。 纯水是指不以任何方式（物理或化学）与其他物质结合的纯的自由水，所含自由能最高，即水势最高。 而当水中溶有任何物质时，由于溶质（分子或离子）与水分子相互作用，消耗了部分自由能，所以任何溶液的水势比纯水低。溶液的溶质越多，溶液的水势越低。 实验理论基础：水势 水势表示水分的化学势，象电流由高电位处流向低电位处一样，水从水势高处流向低处。 植物体细胞之间，组织之间以及植物和环境之间的水分移动方向都由水势差决定。 一个典型的植物细胞的水势应由三部分组成，即Ψw=Ψ?（渗透势）+Ψp（压力势）+Ψm（衬质势） 实验理论基础：水势 渗透势（Ψ?）（溶质势）：由于溶质颗粒的存在，降低了水的自由能，其水势低于纯水，这种水势差即为渗透势。因为纯水水势被定为零，所以渗透势为负值。 衬质势（Ψm）：细胞的衬质，即细胞质胶体与细胞壁对水分子的吸附力造成水势下降的数值。在萌发种子和未形成中央液泡的分生组织中明显。已有中央液泡的细胞则Ψm很高，对总水势的影响可忽略不计。 压力势（Ψp）：植物细胞吸水膨胀时，细胞壁对细胞产生压力，而使水势提高，称为压力势，通常为正值。 实验目的；实验材料、仪器设备与试剂 目的：学习用小液流法测定植物组织水势的方法 材料： 白兰叶片 器材： 试管架、试管、移液管、胶头滴管、打孔器、镊子 试剂： 1mol/L 蔗糖溶液、甲基蓝粉末 实验原理 1、当植物组织与外液接触时发生水分交换： 植物组织的水势低于外液的渗透势（溶质势），组织吸水，外液浓度变大；Ψ植物Ψ? 植物组织的水势高于外液的渗透势（溶质势），组织失水，外液浓度变小；Ψ植物 Ψ? 若两者相等，则水分交换保持动态平衡，外液浓度保持不变； Ψ植物＝Ψ? 实验原理 2、同一种物质浓度不同时其比重不一样，浓度大的比重大，把高浓度的溶液一小液滴放到低浓度溶液中时，液滴下沉；反之则上升。 3、根据外液浓度的变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度。根据以下公式计算出溶液的渗透势，即为植物组织的水势。 实验步骤 （一）配制不同浓度的蔗糖溶液 试管 1 2 3 4 5 6 1mol·L-1 蔗糖溶液（ml） 1 2 3 4 5 6 蒸馏水（ml） 19 18 17 16 15 14 浓度 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 实验步骤 （二）取6个试管为甲组，依次分别加入0.05-0.30mol/kg蔗糖溶液约10mL；取另外6个试管为乙组，分别依次加入上述蔗糖溶液10mL和微量甲基蓝粉末，在上述各瓶标明浓度。 （三）用打孔器在材料的不同部位打取小圆片约50片（打孔要迅速，避开叶脉，选边缘整齐无破损的叶片），，混匀，在乙组每个试管各放入5-20片（视大小），使圆片全部浸没。放置30min并经常摇动。 实验步骤 （四）用胶头滴管吸取乙组各瓶蓝色糖液少许，分别注入对应浓度的甲组各瓶溶液中部，小心放出少量液流，观察蓝色液滴的升降（每次测定均要用待测浓度的甲基蓝糖溶液清洗滴管）。在下表记录并根据前述原理判断叶片材料的等渗浓度。 瓶号 1 2 3 4 5 6 溶液浓度 （mol/l） 液滴移动的方向 实验步骤 可能出现的结果 溶液浓度 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 液滴移动方向 ↓ ↓ — ↑ ↑ ↑ 溶液浓度 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 液滴移动方向 ↓ ↓ ↓ ↑ ↑ ↑ 注意事项 所取材料在植株上的部位要尽量一致，打取叶圆片要避开主脉和伤口；打孔大小在同一组之内一致； 试管、移液管和毛细管等要洗净烘干，移液管与毛细移液管应从低浓度到高浓度依次吸取溶液； 甲基蓝不宜加得过多（溶液呈稍深的蓝色即可），否则将使实验组各管中溶液的比重均加大； 蔗糖溶液用前一定要摇匀，时间放久了的蔗糖溶液会分层，影响结果； 叶片打孔及投入青霉素瓶中要快，防止水分蒸发影响实验结果； 释放蓝色液滴时要缓慢，防止冲力影响液滴移动。 结果计算 当植物细胞内汁液与其周围溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零。此时细胞液与该溶液的渗透势相等。该溶液的浓度称为等渗浓度。因此ψw=ψ?。 溶液渗透势的计算： ψw= ψ?=－P=－iCRT ψ?：溶液的渗透势，以MPa为单位； R＝0.008314MPa·L/mol·K T：绝对温度，即273+t℃； C：等渗浓度，以mol/kg为单位； i：溶液的等渗系数，蔗糖=1。 思考题