植物生理学实验：实验五 丙二醛含量测定.pptVIP

Company Logo LOGO 实验原理 植物在衰老或逆境下遭受伤害，在活性氧积累诱发下发生膜脂过氧化作用，产生丙二醛、二烯轭合物、脂类过氧化物、乙烷等。其中丙二醛（MDA）是膜脂过氧化最重要的产物之一，通常利用它作为膜脂过氧化指标，因此可通过测定MDA了解膜脂过氧化的程度，以间接测定膜系统受损程度以及植物的对逆境条件反应的强弱。 实验原理 丙二醛在高温及酸性环境下可与2-硫代巴比妥酸（TBA）反应产生红棕色的三甲基复合物（3,5,5′-三甲基恶唑2,4-二酮），该物质的吸光系数为155mmol/(L·cm)，在532 nm处有最大吸收峰，并且在600nm处有最小光吸收。 硫代巴比妥酸 丙二醛 3,5,5′-三甲基恶唑2,4-二酮 （三甲川） 实验原理 可溶性糖对此反应有干扰，为消除这种干扰可使用以下公式算出MDA浓度（μmol/L），并进一步算出单位质量组织中MDA含量（μmol/g）。 C（μmol/L）=6.45（A532-A600）-0.56A450 A450、A532和A600分别表示在三种波长处的吸光度值 实验目的；实验材料、仪器设备与试剂 目的：学习和掌握丙二醛法测定植物叶片中过氧化脂质含量的原理和方法。 仪器 分光光度计、离心机、电炉； 研钵、天平、试管架、离心管、移液管、滤纸等。 试剂 5%三氯乙酸（TCA）；0.67%硫代巴比妥酸（用10%TCA配制）；石英砂。 材料：白兰叶片 实验步骤 1. 取0.5g叶片材料，加2mL5%TCA研磨后将匀浆转入离心管，再用3mL5%TCA洗涤研钵后转入离心管。将匀浆在3000r/min下离心10min。 2. 取上清液2mL，加0.67%TBA2mL，混合后在100℃水浴上煮沸30min，冷却后再离心一次。 3. 分别测定上清液在450nm，532nm和600nm处的吸光度值（以0.67 %硫代巴比妥酸溶液为空白），按公式计算MDA浓度 注意事项 反应之后浓度改变 离心时要注意配平问题 如待测液浑浊，可适当增加离心力及时间 作业与思考题 得出实验结果后，代入公式计算出MDA在单位重量材料中的含量，写于实验报告上。【之前问题】 思考题：第二次离心起什么作用？ * 本模板来源于网络，由第一课件网整理发布，免费分享给大家使用。 第一课件网是国内最专业的PPT模板分享网站，所有模板均经严格测试，保证100%下载，100%精彩！ 更多精彩PPT模板，敬请访问 使用时删除此备注即可。 配色方案修改： 配色方案在【格式】--【幻灯片设计】--【配色方案】--【编辑配色方案】下调整。 LOGO的添加： Logo添加修改在【视图】--【母版】--【幻灯片母版】下调整。直接选择logo图片删除或修改。 字体格式的设置： 括标题和文本格式的设置在【视图】--【母版】--【幻灯片母版】下调整。 Company Logo LOGO 本模板来源于网络，由第一课件网整理发布，免费分享给大家使用。 第一课件网是国内最专业的PPT模板分享网站，所有模板均经严格测试，保证100%下载，100%精彩！ 更多精彩PPT模板，敬请访问 使用时删除此备注即可。 配色方案修改： 配色方案在【格式】--【幻灯片设计】--【配色方案】--【编辑配色方案】下调整。 LOGO的添加： Logo添加修改在【视图】--【母版】--【幻灯片母版】下调整。直接选择logo图片删除或修改。 字体格式的设置： 括标题和文本格式的设置在【视图】--【母版】--【幻灯片母版】下调整。